131. V příloze části 6 Speciální část, kapitola 6.1 Léčivé a pomocné látky, článek Melissae folium zní:
„
Melissae folium
Meduňkový list
Synonymum. Folium melissae
Je to usušený list druhu Melissa officinalis L. Obsahuje nejméně 4,0 % hydroxyskořicových derivátů, počítáno jako kyselina rozmarýnová (C₁₈H₁₆O₈; M_r 360,3), vztaženo na vysušenou drogu.
Vlastnosti
Droga má charakteristický pach po citrónu.
Makroskopický a mikroskopický popis, viz Zkoušky totožnosti A a B.
Zkoušky totožnosti
A. Listy mají řapík proměnlivé délky, jsou oválné, srdčité až 8 cm dlouhé a 5 cm široké. Čepel je tenká, na spodní straně se sbíhavou, vyniklou, síťovitou žilnatinou; okraj čepele je hrubě zubatý nebo vroubkovaný. List na svrchní straně světle zelený, na spodní straně světlejší.
B. Droga se upráškuje (355). Prášek je nazelenalý. Pozoruje se pod mikroskopem v chloralhydrátu RS. Droga je charakteristická těmito znaky: úlomky pokožky listu s buňkami se stěnami zprohýbanými; jednobuněčné krátké přímé kuželovité krycí chlupy s jemně proužkovanou kutikulou; mnohobuněčné jednořadé krycí chlupy s kulovitou koncovou buňkou a silnou, bradavčitou kutikulou; osmibuněčné žláznaté chlupy typu Lamiaceae; žláznaté chlupy s jednobuněčnou až tříbuněčnou nohou a jednobuněčnou nebo řidčeji dvoubuněčnou hlavičkou; diacytické průduchy (2.8.3) jen na spodní straně listu.
C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu pro TLC R.
Zkoušený roztok. 2,0 g práškované drogy (355) se v 250ml baňce s kulatým dnem smíchá se 100 ml vody R a destiluje se 1 h za použití destilačního přístroje pro Stanovení silic v rostlinných drogách (2.8.12), do dělené trubice se přidá 0,50 ml xylenu R. Po ukončení destilace se organická fáze převede pomocí malého množství xylenu R, jímž se promyje dělená trubice, do 1ml baňky a zředí se jím na 1,0 ml.
Porovnávací roztok. 1,0 μl citronellalu R a 10,0 μl citralu R se rozpustí v 25 ml xylenu R.
Na vrstvu se nanese do pruhů 20 μl zkoušeného roztoku a 10 μl porovnávacího roztoku. Vyvíjí se směsí objemových dílů ethylacetatu R a hexanu R (10 + 90) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu, postříká se anisaldehydem RS, zahřívá se 10 min až 15 min při 100 °C až 105 °C a přitom se pozoruje v denním světle. Na chromatogramu porovnávacího roztoku je v dolní třetině šedofialová až modrofialová dvojitá skvrna (citral) a nad ní šedá až šedofialová skvrna (citronellal). Na chromatogramu zkoušeného roztoku skvrny odpovídají polohou a zbarvením skvrnám na chromatogramu porovnávacího roztoku a mezi nimi je červenofialová skvrna (epoxykaryofylen). Na chromatogramu zkoušeného roztoku mohou být další skvrny.
Zkoušky na čistotu
Cizí příměsi (2.8.2). Nejvýše 10 % stonků o průměru větším než 1 mm a nejvýše 2 % ostatních cizích příměsí. Stanoví se s 20 g drogy.
Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 10,0 %. 1,000 g práškované drogy (355) se suší 2 h v sušárně při 100 °C až 105 °C.
Celkový popel (2.4.16). Nejvýše 12,0 %.
Stanovení obsahu
Základní roztok. K 0,200 g práškované drogy (355) se přidá 190 ml lihu R 50% (V/V) a vaří se 30 min ve vodní lázni pod zpětným chladičem, po ochlazení se zfiltruje. Filtr se promyje 10 ml lihu R 50% (V/V). Filtrát a promývací tekutina se spojí v odměrné baňce a zředí se lihem R 50% (V/V) na 200,0 ml.
Zkoušený roztok. K 1,0 ml základního roztoku se ve zkumavce přidají 2 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS, 2 ml roztoku připraveného rozpuštěním 10 g dusitanu sodného R a 10 g molybdenanu sodného R ve 100 ml vody R, pak se přidají 2 ml hydroxidu sodného zředěného RS, zředí se vodou R na 10,0 ml a promíchá se.
Kontrolní roztok. Ve druhé zkumavce se k 1,0 ml základního roztoku přidají 2 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS, 2 ml hydroxidu sodného zředěného RS a zředí se vodou R na 10,0 ml.
Měří se ihned absorbance (2.2.25) zkoušeného roztoku při 505 nm proti kontrolnímu roztoku.
Obsah hydroxyskořicových derivátů v procentech, počítáno jako kyselina rozmarýnová (C₁₈H₁₆O₈), se vypočítá podle vztahu:
$\frac{A.5}{m},$
v němž značí:
A - absorbanci zkoušeného roztoku při 505 nm,
m - hmotnost zkoušené drogy v gramech.
Specifická absorbance kyseliny rozmarýnové je 400.
Uchovávání
V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
“