138. V příloze části 6 Speciální část, kapitola 6.1 Léčivé a pomocné látky, se za článek Natrii valproas doplňuje článek Neohesperidin-dihydrochalconum, který zní:
„
Neohesperidin-dihydrochalconum
Neohesperidin-dihydrochalkon
| C28H36O15 | Mr 612,58 | CAS 20702-77-6 |
Je to 1-{4-[[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glukopyranosyl]oxy]-2,6-dihydroxyfenyl}-3-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)propan-1-on1). Počítáno na bezvodou látku, obsahuje 96,0 % až 101,0 % sloučeniny C28H36O15.
Vlastnosti
Vzhled. Bílý nebo žlutobílý prášek.
Rozpustnost. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v dimethylsulfoxidu, dobře rozpustný v methanolu a prakticky nerozpustný v dichlormethanu.
Zkoušky totožnosti
A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24).
Porovnání s neohesperidin-dihydrochalkonem CRL.
B. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Stanovení obsahu.
Hodnocení. Na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá hlavní pík velikostí a retenčním časem hlavnímu píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
Zkoušky na čistotu
Vzhled roztoku. Měří se roztok připravený takto: 0,25 g se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 25 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok Ž4 (2.2.2, Metoda II).
Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí v dimethylsulfoxidu R a zředí se jím na 50,0 ml.
Zkoušený roztok (b). 10,0 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí dimethylsulfoxidem R na 20,0 ml.
Porovnávací roztok (a). 50,0 mg neohesperidin-dihydrochalkonu CRL se rozpustí v dimethylsulfoxidu R a zředí se jím na 50,0 ml.
Porovnávací roztok (b). 4,0 mg neohesperidin-dihydrochalkonu nečistoty B CRL se rozpustí v dimethylsulfoxidu R a zředí se jím na 100,0 ml.
Porovnávací roztok (c). 1,0 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí dimethylsulfoxidem R na 100,0 ml.
Porovnávací roztok (d). Je-li nečistota F a nečistota G připravována in situ, suspenduje se 0,10 g zkoušené látky v 10,0 ml roztoku kyseliny sírové R (100 g/l). Vzorek se 5 min zahřívá na vodní lázni. V čas potřeby se 1,0 ml výsledného roztoku zředí dimethylsulfoxidem R na 50,0 ml.
Kolona:
- rozměry: délka 0,15 m, vnitřní průměr (d) 3,9 mm;
- stacionární fáze: sférický silikagel oktadecylsilanizovaný pro chromatografii R (4 μm) s obsahem uhlíku 7 %;
- teplota: 30 °C.
Mobilní fáze. Směs objemových dílů acetonitrilu R a roztoku připraveného přidáním 5,0 ml kyseliny octové ledové R k 1000,0 ml vody R (20 + 80).
Průtoková rychlost. 1,0 ml/min.
Detekce. Spektrofotometr, 282 nm.
Nástřik. Po 10 μl zkoušeného roztoku (a) a porovnávacích roztoků (a), (b), (c) a (d).
Doba záznamu. Pětinásobek retenčního času neohesperidin-dihydrochalkonu, který je asi 10 min.
Relativní retenční časy vztažené na neohesperidin-dihydrochalkon:
- nečistota B: asi 0,4;
- nečistota D: asi 0,7;
- nečistota F: asi 1,2;
- nečistota G: asi 3,7.
Test způsobilosti systému:
- rozlišení: nejméně 2,5 mezi prvním pikem (neohesperidin-dihydrochalcon) a druhým píkem (nečistota F) na chromatogramu porovnávacího roztoku (d);
- chromatogram porovnávacího roztoku (a) odpovídá chromatogramu neohesperidin-dihydrochalkonu CRL.
Limity:
- nečistota B: nejvýše plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (2 %);
- nečistota D: nejvýše dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) (2 %);
- jakákoliv další nečistota: nejvýše 0,5násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) (0,5 %);
- celkový obsah nečistot, kromě nečistoty B: nejvýše 2,5násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) (2,5 %);
- zanedbatelnost píků: nejvýše 0,05násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) (0,05 %).
Těžké kovy (2.4.8). Nejvýše 10 μg/g; 2,0 g vyhovují limitní zkoušce D na těžké kovy. K přípravě porovnávacího roztoku se použijí 2 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
Voda, semimikrostanovení (2.5.12). Nejvýše 12,0 %; stanoví se s 0,200 g zkoušené látky.
Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,2 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
Stanovení obsahu
Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29) způsobem popsaným ve zkoušce Příbuzné látky.
Nástřik. 10 μl; nastřikuje se zkoušený roztok (b) a porovnávací roztoky (a) a (d).
Test způsobilosti systému:
- rozlišení: nejméně 2,5 mezi prvním pikem (neohesperidin-dihydrochalkon) a druhým pikem (nečistota F) na chromatogramu porovnávacího roztoku (d);
- opakovatelnost: porovnávací roztok (a).
Vypočítá se obsah C28H36O15 v procentech za použití chromatogramu porovnávacího roztoku (a) a deklarovaného obsahu C28H36O15 v neohesperidin-dihydrochalkonu CRL. Provede se korekce na obsah vody ve zkoušené látce.
Uchovávání
Chráněn před světlem.
Nečistoty
A. 1-{4-[[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glukopyranosyl]oxy]-2,6-dihydroxyfenyl}ethanon2) (floroacetofenon-neohesperidosid),
B. 7-{[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glukopyranosyl]oxy}-5-hydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)-4H-chromen-4-on3) (neodiosmin),
a enantiomer
C. (2RS)-7-{[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glukopyranosyl]oxy}-5-hydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)-2,3-dihydro-4H-chromen-4-on4) (neohesperidin),
D. 1-{4-[[2-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)-β-D-glukopyranosyl]oxy]-2,6-dihydroxyfenyl}-3-(4-hydroxyfenyl)propan-1-on5) (naringin-dihydrochalkon),
E. X = Rh: 1-{4-[[6-O-(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)- β-D-glukopyranosyl]oxy]-2,6-dihydroxyfenyl}-3-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)propan-1-on6) (hesperidin-dihydrochalkon),
F. X = H: 1-[4-(β-D-glukopyranosyloxy)-2,6-dihydroxyfenyl]-3-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)propan-1-on (hesperetin-dihydrochalkon-7´-glukosid),
G. 3-(3-hydroxy-4-methoxyfenyl)-1-(2,4,6-trihydroxyfenyl)propan-1-on (hesperetin-dihydrochalkon).
“