28. V příloze části 6 Speciální část, kapitola 6.1 Léčivé a pomocné látky, se za článek Amantadini hydrochloridum doplňuje článek Ambroxoli hydrochloridum, který zní:
„
† Ambroxoli hydrochloridum
Ambroxoliumchlorid

C13H19Br2ClN2O

Mr 414,57

CAS 15942-05-9

Je to trans-N-(2-amino-3,5-dibrombenzyl)-4-hydroxycyklohexan-1-ylamoniumchlorid¹). Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C₁₃H₁₉Br₂ClN₂O.
Vlastnosti
Vzhled. Bílý nebo nažloutlý krystalický prášek.
Rozpustnost. Mírně rozpustný ve vodě, dobře rozpustný v methanolu, prakticky nerozpustný v dichlormethanu.
Zkoušky totožnosti
Základní sestava zkoušek: B a D.
Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
A. 20,0 mg se rozpustí v kyselině sírové 0,05 mol/l RS a zředí se jí na 100,0 ml. 2,0 ml tohoto roztoku se zředí kyselinou sírovou 0,05 mol/RS na 10,0 ml. Měří se absorbance (2.2.25) při 200 nm až 350 nm; roztok vykazuje dvě absorpční maxima, při 245 nm a 310 nm. Poměr absorbance v maximu při 245 nm k absorbanci v maximu při 310 nm je 3,2 až 3,4.
B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24).
Porovnání s ambroxoliumchloridem CRL.
C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27).
Zkoušený roztok. 50 mg se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 5 ml.
Porovnávací roztok. 50 mg ambroxoliumchloridu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 5 ml.
Stacionární fáze. Deska s vrstvou silikagelu F₂₅₄ pro TLC R.
Mobilní fáze. Směs objemových dílů amoniaku 26% R, 1-propanolu R, ethylacetatu R a hexanu R (1 + 10 + 20 + 70).
Nanášení. Po 10 μl.
Vyvíjení. Po dráze delší než 2/3 desky.
Sušení. Na vzduchu.
Detekce. Pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm.
Hodnocení. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku.
D. 25 mg se rozpustí v 2,5 ml vody R, smíchá se s 1,0 ml amoniaku zředěného RS1 a nechá se 5 min stát. Zfiltruje se a filtrát se okyselí kyselinou dusičnou zředěnou RS. Filtrát vyhovuje zkoušce (a) na chloridy (2.3.1).
Zkoušky na čistotu
Roztok S. 0,75 g se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 15 ml.
Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok Ž₆ (2.2.2, Metoda II).
Hodnota pH (2.2.3). 4,5 až 6,0. Měří se roztok připravený rozpuštěním 0,2 g ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředěním stejným rozpouštědlem na 20 ml.
Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
Roztoky se připravují těsně před použitím.
Zkoušený roztok. 50,0 mg se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 50,0 ml.
Porovnávací roztok (a). 5,0 ml zkoušeného roztoku se zředí vodou R na 250,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí mobilní fází na 20,0 ml.
Porovnávací roztok (b). 5 mg zkoušené látky se rozpustí v 0,2 ml methanolu R a přidá se 0,04 ml směsi objemových dílů formaldehydu R a vody R (1 + 99). 5 min se zahřívá při 60 °C a odpaří se do sucha pod proudem dusíku. Zbytek se rozpustí v 5 ml vody R a zředí se mobilní fází na 20 ml.
Kolona:
- rozměry: délka je 0,25 m, vnitřní průměr je 4,0 mm,
- stacionární fáze: silikagel oktadecylsilanizovaný pro chromatografii R (5 μm).
Mobilní fáze. Připraví se směs stejných objemových dílů acetonitrilu R a roztoku připraveného takto: 1,32 g fosforečnanu amonného R se rozpustí v 900 ml vody R, pH se upraví na hodnotu 7,0 kyselinou fosforečnou R a zředí se vodou R na 1000 ml.
Průtoková rychlost. 1 ml/min.
Detekce. Spektrofotometr při 248 nm.
Nástřik. Nastřikuje se po 20 μl.
Citlivost. Porovnávací roztok (a).
Doba záznamu. Trojnásobek retenčního času hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku.
Test způsobilosti systému:
- rozlišení: nejméně 4,0 mezi pikem nečistoty B a pikem ambroxolu na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).
Limity:
- jakákoliv nečistota: nejvýše plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,1 %),
- celkový obsah všech nečistot: nejvýše trojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,3 %),
- zanedbatelnost píků: 0,1násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
Těžké kovy (2.4.8). Nejvýše 20 μg/g; 1,0 g vyhovuje limitní zkoušce C na těžké kovy. Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.
Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
Stanovení obsahu
0,300 g se rozpustí v 70 ml lihu 96% R a přidá se 5 ml kyseliny chlorovodíkové 0,01 mol/l VS. Titruje se hydroxidem sodným 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence (2.2.20). Odečte se spotřeba mezi dvěma inflexními body.
1 ml hydroxidu sodného 0,1 mol/l VS odpovídá 41,46 mg C₁₃H₁₉Br₂ClN₂O.
Uchovávání
Chráněn před světlem.
Separandum.
Nečistoty

A. Ar-CH₂OH: (2-amino-3,5-dibromfenyl)methanol,

B. trans-4-(6,8-dibrom-1,4-dihydrochinazolin-3(2H)-yl)cyklohexanol,

C. trans-4-{[(E)-2-amino-3,5-dibrombenzyliden]amino}cyklohexanol,

D. cis-4-[(2-amino-3,5-dibrombenzyl)amino]cyklohexanol,
E. Ar-CH = O: 2-amino-3,5-dibrombenzaldehyd.
“