2. Do spermatu musí být přidána níže uvedená antibiotika tak, aby po konečném naředění spermatu bylo dosaženo následujících koncentrací:

nejméně:	500 µg streptomycinu na 1 ml,
	500 MJ penicilinu na 1 ml,
	150 µg linkomycinu na 1 ml,
	300 µg spektinomycinu na 1 ml.

Může být použita i jiná kombinace antibiotik s rovnocenným účinkem proti kampylobakterům, leptospirám a mykoplazmatům.
Ihned po přidání antibiotik musí být zředěné sperma udržováno při teplotě nejméně 5 °C minimálně 45 minut.