Dodatek 4
Stanovení koncentrace IF a FISH pozitivních buněk

1. Vypočítá se průměrný počet typických fluoreskujících buněk v jednom pozorovacím poli (c).

2. Vypočítá se počet typických fluoreskujících buněk v okénku mikroskopického sklíčka (C).
C=c×S/s,
kde S = plocha jednoho pole na sklíčku s více jamkami a
s = plocha pole objektivu.
s=π2/4G2K2,
kde i = koeficient pole (v rozmezí od 8 ‒ 24 podle typu okuláru),
K = tubusový koeficient (1 nebo 1,25),
G = zvětšení objektivu (100 ×, 40 × atd.).

3. Vypočítá se počet charakteristických fluoreskujících buněk na 1 ml resuspendované pelety (N).
N=C×1 000/y×F,
kde y = objem resuspendované pelety v každém okénku a
F = zřeďovací faktor resuspendované pelety