2. V příloze č. 1 požadavky na identitu a čistotu barviv E 160a (i) Směs karotenů a E 160a (ii) Beta karoten znějí:
„E 160a (i) SMĚS KAROTENŮ
1. ROSTLINNÉ KAROTENY

Synonyma	CI potravinářská oranž 5
Definice	Směs karotenů se získává extrakcí rozpouštědlem přírodních druhů jedlých rostlin, mrkve, rostlinných olejů, trávy, vojtěšky a kopřivy Hlavní barevná látka sestává z karotenoidů, z nichž největší část tvoří beta-karoten. Mohou být přítomny také alfa-, gama-karoten a jiné pigmenty. Kromě barevných pigmentů může látka obsahovat oleje, tuky a vosky přirozeně se vyskytující ve výchozí surovině. Při extrakci mohou být použita pouze tato rozpouštědla: aceton, methylethylketon, methanol, ethanol, propandiol, hexan (benzen ne více než 0,05%v/v), dichlormethan a oxid uhličitý
Skupina	Karotenoid
Číslo Color Index	75130
Einecs	230-636-6
Kód E	E 160a (i)
Chemický vzorec	Beta-karoten: C40H56
Molekulová hmotnost	Beta-karoten: 536,88
Obsah	Obsah karotenů (přepočteno na beta-karoten) je nejméně 5 %.
	U produktů získaných extrakcí rostlinných olejů: ne méně než 0,2 % v jedlých tucích.
	$E_{1\mathrm{cm}}^{1\%}$ 2500 při cca 440-457 nm v cyklohexanu
Identifikace
Spektrometrie	Maximum v cyklohexanu při 440-457 nm a 470-486 nm
Čistota
Zbytky rozpouštědel	Aceton	Ne více než 50 mg/kg, jednotlivě nebo v kombinaci
	Methylethylketon
	Methanol
	Propandiol
	Hexan
	Ethanol
	Dichlormethan	Ne více než 10 mg/kg
Olovo	Ne více než 5 mg/kg

2. KAROTENY POCHÁZEJÍCÍ Z ŘAS

Synonyma	CI potravinářská oranž 5
Definice	Směs karotenů produkovaných řasou Dunaliella salina, rostoucí ve velkých slaných jezerech v oblasti Whyalla v Jižní Austrálii. Beta-karoten se extrahuje esenciálním olejem. Přípravek je 20-30 % suspenze v jedlém oleji. Podíl trans a cis izomerů se pohybuje v rozmezí 50/50 -71/29 Hlavní barevná látka sestává z karotenoidů, z nichž největší část tvoří beta-karoten. Mohou být přítomny alfa-karoten, lutein, zeaxanthin a beta-kryptoxanthin. Kromě barevných pigmentů může látka obsahovat oleje, tuky a vosky přirozeně se vyskytující ve výchozí surovině
Skupina	Karotenoid
Číslo Color Index	75130
Chemický vzorec	Beta-karoten C40H56
Molekulová hmotnost	Beta-karoten 536,88
Obsah	Obsah karotenů (počítáno jako beta-karoten) je nejméně 20 %
	$E_{1\mathrm{cm}}^{1\%}$ 2500 při cca 440-457 nm v cyklohexanu
Identifikace
A. Spektrometricky	Maximum v cyklohexanu při 440nnm - 457 nm a 474 nm - 486 nm
Čistota
Přírodní tokoferoly v jedlém oleji	Ne více než 0,3 %
Olovo	Ne více než 5 mg/kg

E 160a (ii) BETA-KAROTEN
1. BETA-KAROTEN

Synonyma	CI potravinářská oranž 5
Definice	Tyto specifikace platí především pro všechny trans-izomery beta-karotenu spolu s menším množstvím ostatních karotenoidů. Zředěné a stabilizované preparáty mohou mít jiné poměry cis- a trans-izomerů
Skupina	Karotenoid
Číslo Color Index	40800
Einecs	230-636-6
Kód E	E160a (ii)
Chemické názvy	Beta-karoten, beta,beta-karoten
Chemický vzorec	C40H56
Molekulová hmotnost	536,88
Obsah	Ne méně než 96 % všech barevných látek (vyjádřeno jako beta-karoten)
	$E_{1\mathrm{cm}}^{1\%}$2500 při cca 440-457 nm v cyklohexanu
Popis	Červené až hnědavě červené krystaly nebo krystalický prášek
Identifikace
Spektrometrie	Maximum v cyklohexanu při cca 453-456 nm
Čistota
Síranový popel	Ne více než 0,2 %
Vedlejší barevné látky	Karotenoidy jiné než beta-karoten: ne více než 3,0 % všech barevných látek
Olovo	Ne více než 2 mg/kg

2. BETA-KAROTEN POCHÁZEJÍCÍ Z BLAKESLEA TRISPORA

Synonyma	CI potravinářská oranž 5
Definice	Získává se fermentací směsné kultury grampozitivních (+) a gramnegativních (-) přírodních kmenů houby Blakeslea trispora. Beta-karoten je extrahován z biomasy ethylacetátem nebo isobutylacetátem a následně isopropylalkoholem a krystalizován. Krystalická látka obsahuje především trans beta-karoten. Vzhledem k přirozenému procesu je pro produkt specifické, že obsahuje přibližně 3 % směsi karotenů
Skupina	Karotenoid
Číslo Color Index	40800
Einecs	230-636-6
Kód E	E 160a (ii)
Chemické názvy	Beta-karoten, beta,beta-karoten
Chemický vzorec	C40H56
Molekulová hmotnost	536,88
Obsah	Ne méně než 96 % všech barevných látek (vyjádřeno jako beta-karoten)
	$E_{1\mathrm{cm}}^{1\%}$ 2500 při cca 440-457 nm v cyklohexanu
Popis	Červené až hnědavě červené nebo fialové krystaly či krystalický prášek (barva se liší podle použitého extrakčního činidla a podmínek krvstalizace)
Identifikace
Spektrometrie	Maximum v cyklohexanu při cca 453-456 nm
Čistota
Zbytky rozpouštědel	Ethylacetát	Ne více než 0,8 %
	Ethanol	jednotlivě nebo v kombinaci
	Isobutylacetát	Ne více než 1,0%
	Isopropylalkohol	Ne více než 0,1%
Síranový popel	Ne více než 0,2 %
Vedlejší barevné látky	Karotenoidy jiné než beta-karoten: ne více než 3,0 % všech barevných látek
Olovo	Ne více než 2 mg/kg
Mykotoxiny:
Aflatoxin B1	Negativní
Trichotecen T2
Ochratoxin
Zearalenon
Plísně	Ne více než 100 KTJ/gram
Kvasinky	Ne více než 100 KTJ/gram
Salmonella	Negativní v 25 gramech
Escherichia coli	Negativní v 5 gramech“.