A. KVALITATIVNÍ STANOVENÍ PEROXODISÍRANŮ, BROMIČNANŮ A PEROXIDU VODÍKU
1. PRINCIP
Peroxodisíran sodný, peroxodisíran draselný a peroxodisíran amonný, bromičnan draselný, bromičnan sodný a peroxid vodíku – bez ohledu na to, zda pochází či nepochází z peroxidu barnatého – se identifikují pomocí sestupné papírové chromatografie, při které se používá dvou mobilních fází.
2. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE
Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší
2.1 0,5% (m/V) vodné referenční roztoky následujících sloučenin:
2.1.1 Peroxodisíran disodný
2.1.2 Peroxodisíran didraselný
2.1.3 Peroxodisíran diamonný
2.1.4 Bromičnan draselný
2.1.5 Bromičnan sodný
2.1.6 Peroxid vodíku
2.2 Mobilní fáze A, 80% (V/V) ethanol
2.3 Mobilní fáze B, benzen - methanol - 3-methyl-butan-1-ol - voda (34:38:18:10, V/V/V/V)
2.4 Detekční činidlo A, 10% (m/V) vodný roztok jodidu draselného
2.5 Detekční činidlo B, 1% (m/V) vodný roztok škrobu
2.6 Detekční činidlo C, 10% (m/m) kyselina chlorovodíková
2.7 4 mol/l kyselina chlorovodíková
3. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
3.1 Chromatografický papír (papír Whatman č. 3 nebo č. 4 nebo jejich ekvivalenty)
3.2 Mikropipeta na 1 μl
3.3 Odměrné baňky na 100 ml
3.4 Skládané filtry
3.5 Zařízení pro sestupnou papírovou chromatografii
4. PŘÍPRAVA VZORKU
4.1 Prostředky rozpustné ve vodě
Od každého vzorku se připraví dva roztoky rozpuštěním 1 g a 5 g prostředku ve 100 ml vody. 1 μl každého z těchto roztoků se použije pro provedení papírové chromatografie popsané v oddíle 5.
4.2 Prostředky částečně rozpustné ve vodě
Naváží se 1 g a 5 g vzorku a rozptýlí se v 50 ml vody, v obou případech se doplní vodou na 100 ml a promíchají se. Obě suspenze se přefiltrují přes skládaný filtr (3.4) a z každého z filtrátů se použije 1 μl pro provedení papírové chromatografie popsané v oddíle 5.
4.2.2 Ještě jednou se připraví dvě suspenze vzorků rozptýlením 1 g a 5 g v 50 ml vody, okyselí se zředěnou kyselinou chlorovodíkovou (2.7), doplní se vodou na 100 ml a promíchají se. Disperze se přefiltrují přes skládaný filtr (3.4) a 1 μl každého z těchto roztoků se použije pro provedení papírové chromatografie popsané v oddíle 5.
4.3 Krémy
5 g a 20 g každého prostředku se rozptýlí ve 100 ml vody a disperze se použijí pro provedení papírové chromatografie popsané v oddíle 5.
5. POSTUP
5.1 Přiměřené množství rozpouštědel A (2.2) a B (2.3) se umístí do dvou oddělených chromatografických komor, aby se provedla sestupná papírová chromatografie. Chromatografické komory se sytí párami rozpouštědla alespoň 24 hodin.
5.2 1 μl roztoku vzorku a všech referenčních roztoků připravených podle oddílu 4 a bodu 2.1 se nanese na startovní body proužku chromatografického papíru (Whatman č. 3 nebo ekvivalentní) 40 cm dlouhého a 20 cm širokého (3.1) nebo jiných vhodných rozměrů a rozpouštědlo se nechá odpařit na vzduchu.
5.3 Chromatografický proužek (5.2) se umístí do chromatografické komory tanku naplněné vyvíjecím rozpouštědlem A (5.1) a vyvíjí se, dokud čelo rozpouštědla nepostoupí o 35 cm (asi 15 hodin).
5.4 Postup popsaný v bodech 5.2 a 5.3 se provede stejně s použitím chromatografického papíru (Whatman č. 4 nebo ekvivalentní) (3.1) a mobilní fáze B. Chromatografie probíhá, dokud čelo rozpouštědla nepostoupí o 35 cm (asi pět hodin).
5.5 Po ukončení vyvíjení se chromatogramy vyjmou a usuší se na vzduchu.
5.6 Skvrny se objeví po následném postříkání:
5.6.1 detekčním činidlem A a krátce poté detekčním činidlem B (2.5). Skvrny peroxodisíranů se na chromatogramu objeví nejdříve a budou je následovat skvrny peroxidu vodíku. Skvrny se označí tužkou;
5.6.3 detekčním činidlem C (2.6) na chromatogramech získaných podle bodu 5.6.1; přítomnost bromičnanů se projeví šedavě modrými skvrnami na chromatogramu.
5.7 Za výše zmíněných podmínek vztahujících se k vyvíjecím rozpouštědlům A (2.2) a B (2.3) jsou hodnoty Rf referenčních látek (2.1) přibližně následující:
| Mobilní fáze A (2.2) | Mobilní fáze B (2.3) | |
| Peroxodisíran sodný | 0,40 | 0,10 |
| Peroxodisíran draselný | 0,40 | 0,02 + 0,05 |
| Peroxodisíran amonný | 0,50 | 0,10 + 0,20 |
| Bromičnan sodný | 0,40 | 0,20 |
| Bromičnan draselný | 0,40 | 0,10 + 0,20 |
| Peroxid vodíku | 0,80 | 0,80 |