k vyhlášce č.222/1996 Sb.
Obecné podmínky pro použití zkušební metody

1. Pracovní postup
Pracovní postup obsahuje dostatečně přesné a podrobné instrukce k provádění zkušební metody:

2. Shodnost metody
Shodnost metody označuje těsnost shody mezi nezávislými výsledky zkoušek získanými za předem specifikovaných podmínek. Míra shodnosti se počítá jako směrodatná odchylka výsledků zkoušek s_x.
Odhad hodnoty s_x se počítá pomocí rozpětí R, které je definováno jako rozdíl mezi nejmenší a největší hodnotou paralelního stanovení.
Provádí-li se dvě paralelní stanovení na m vzorcích, je směrodatná odchylka vyjádřena
${\mathrm{s}}_{\mathrm{x}}=\mathrm{}\sqrt{\frac{\sum _{\mathrm{j}=1}^{\mathrm{e}}{{\mathrm{R}}_{\mathrm{j}}}^2}{2\mathrm{m}}}$
kde R_j = | x _j1 - x _j2 | je rozpětí, tj. rozdíl dvo u paralelních stanovení, provedených na j-tém vzorku. Z vypočtené směrodatné odchylky s_x se vypočte ukazatel opakovatelnosti (r) analytické metody v dané analytické laboratoři. Pro opakovatelnost /r/ platí (při dvou paralelních opakování a hladinu významnosti P (0,95)): r = 2,8.s_x. Směrodatná odchylka s_x resp. opakovatelnost se určuje z dostatečně velkého počtu vzorků téhož druhu materiálu (p ≥ 20). Směrodatná odchylka s_x se neurčuje z jedné ověřovací série, ale z dlouhodobého měření v dané laboratoři na vzorcích téhož druhu materiálu.

3. Správnost metody
Správnost metody určuje těsnost shody mezi průměrnou hodnotou získanou z velké řady výsledků zkoušek a přijatou referenční hodnotou. Referenční hodnota se odvodí jako

4. Linearita metody
Linearitou metody se označuje přímková závislost mezi odezvou detekce a koncentrací analytu. Linearita se ověřuje metodami matematické statistiky. V případě zkušebních metod nevykazujících lineární závislost mezi odezvou detekce a koncentrací analytu, postupuje se metodami matematické statistiky, které nejsou založeny na předpokladu většinou normálního rozdělení a nepoužívají odhadu žádných parametrů.

5. Citlivost metody
Citlivost metody určuje nejmenší rozdíl koncentrace stanovovaného znaku, jež odpovídá nejmenšímu zjistitelnému rozdílu, jenž může být zjištěn vhodnou odezvou signálu metody.

6. Mez stanovitelnosti metody
Mezí stanovitelnosti metody se rozumí nejnižší koncentrace stanovovaného znaku, kdy je dosažena statisticky přijatelná správnost a přesnost. Většinou se jako mez stanovitelnosti bere první bod kalibrační křivky.

1.1 princip postupu, chemické reakce a případné interakce stanovovaného znaku, popis matrice a rozmezí stanovovaného znaku

1.2 použité chemikálie včetně chemické čistoty, příprava roztoků s uvedením koncentrace a stability

1.3 podrobný postup zkoušky, údaje o kalibraci, měření, výpočet

d) jestliže není k dispozici očekávaná hodnota veličiny uvedená v bodech a) až c), uvede se střední hodnota specifikovaného souboru měření (medián, průměr).

b) přiřazená nebo certifikovaná hodnota založená na experimentálních pracích národních nebo mezinárodních organizací

c) odsouhlasená nebo certifikovaná hodnota založená na spolupráci pod patronací vědeckých nebo technických skupin

a) teoretická nebo stanovená hodnota založená na vědeckých podkladech

7. Selektivita metody
Selektivita metody udává přehled o použitelnosti zkušební metody vzhledem ke koncentraci rušivých prvků. Zpravidla se udává, jaká koncentrace určitého znaku v matrici vzorku nemá statisticky významný vliv na správnost výsledků.
Úplné znění validačního programu bude obsaženo ve Věstníku ministerstva zemědělství České republiky.

8. Výpočet opakovatelnosti a reprodukovatelnosti
Opakovatelnost vyjadřuje shodnost za podmínek opakovatelnosti a reprodukovatelnost shodnost za podmínek reprodukovatelnosti. Pro mez opakovatelnosti (r) a reprodukovatelnosti (R) platí
r = 2,8 x s_r resp. r = 2,8.s_x (viz čl. 2 přílohy 15); R = 2,8 x s_R, kde odhad rozptylu reprodukovatelnosti s_R² je dán součtem odhadu rozptylu opakovatelnosti s_r² a mezilaboratorního rozptylu s_L² a platí:
s_R² = s_r² + s_L²
${{\mathrm{s}}_{\mathrm{r}}}^2=\mathrm{}\frac{\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}\left({\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}-\mathrm{}1\right)\mathrm{x}\mathrm{}{{\mathrm{s}}_{\mathrm{i}}}^2}{\left(\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}\right)-\mathrm{p}}$
Ve speciálním případě, kdy pro všechna n_i platí n_i=n=2, se použije rozpětí w_i=2s_i, čímž se získají vztahy:
kde n_i je počet výsledků a yi je jeden takovýto výsledek, p je počet laboratoří, které poskytly alespoň jeden výsledek.
$\stackrel{̿}{\mathrm{n}}=\mathrm{}\frac{1}{\mathrm{p}-\mathrm{}1}\mathrm{}\left[\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}-\mathrm{}\frac{{\sum }_{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}}^2}{\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}}\right]$
Hodnoty s_r² a s_L² se určí podle následujících rovnic:
${{\mathrm{s}}_{\mathrm{L}}}^2=\mathrm{}\frac{1}{\mathrm{p}-1}\mathrm{}\left[\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}{\left({\stackrel{-}{\mathrm{y}}}_{\mathrm{i}}-\mathrm{}\stackrel{̿}{\mathrm{y}}\right)}^2\right]-\mathrm{}{{\mathrm{s}}_{\mathrm{r}}}^2$
$\stackrel{̿}{\mathrm{y}}=\mathrm{}\frac{\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}{\stackrel{-}{\mathrm{y}}}_{\mathrm{i}}}{\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}}$
${{\mathrm{s}}_{\mathrm{i}}}^2=\mathrm{}\frac{1}{{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}\mathrm{}1}\mathrm{}\sum _{\mathrm{i}=1}^{{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}}{\left(\stackrel{-}{\mathrm{y}}-\mathrm{}{\mathrm{y}}_{\mathrm{i}}\right)}^2$
kde
a
${{\mathrm{s}}_{\mathrm{L}}}^2=\mathrm{}\frac{1}{\mathrm{p}-1}\mathrm{}\left[\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{\mathrm{n}}_{\mathrm{i}}{\left({\stackrel{-}{\mathrm{y}}}_{\mathrm{i}}-\mathrm{}\stackrel{̿}{\mathrm{y}}\right)}^2\right]-\mathrm{}\frac{{{\mathrm{s}}_{\mathrm{r}}}^2}{2}\mathrm{},$
${{\mathrm{s}}_{\mathrm{L}}}^2=\mathrm{}\frac{1}{2\mathrm{p}}\mathrm{}\sum _{\mathrm{i}=1}^{\mathrm{p}}{{\mathrm{w}}_{\mathrm{i}}}^2$