c) Stanovení kysličníků dusíku (jako kysličník dusičitý)

16. Kysličník dusičitý reaguje s roztokem hydroxidu sodného za vzniku dusitanu a dusičnanu sodného podle rovnice
2NO₂ + 2NaOH =» NaNO₂ + NaNO₃ + H₂O
Vzniklý dusitan sodný dává s činitelem pro stanovení dusitanů červené zbarvení, jehož intenzita se změří na spektrofotometru.

17. Ke stanovení je třeba:
Spektrofotometr běžného obchodního typu
Hydroxid sodný, roztok c(NaOH) = 0,02 mol.dm^-3
Činidlo pro stanovení dusitanů; příprava: 0,5 g kyseliny sulfanilové se rozpustí ve 150 cm³ 30 % roztoku kyseliny octové (roztok 1); 0,3 g 1-naftylaminu se asi 3 minuty povaří ve 20 cm³ vody, roztok se zfiltruje a smíchá se 125 cm³ vody a 25 cm³ 30 % roztoku kyseliny octové (roztok 2). Oba roztoky se uchovávají odděleně v láhvích z tmavého skla se zabroušenými zátkami. Krátce před použitím se roztoky 1 a 2 smíchají (1+1). Zrůžoví-li činidlo do 30 minut po smíchání, musí se připravit oba roztoky čerstvé.
Zředěný základní roztok dusitanu sodného obsahující v 1 cm³ 0,0005 mg dusitanů (odpovídá 0,001 mg kysličníku dusičitého).

18. Zjištění průměrné absorbance odpovídající koncentraci 1 mg kysličníku dusičitého ve 100 cm³ roztoku. Do 6 odměrných baněk na 100 cm³ se postupně odpipetuje 0; 2; 10; 20; 30 a 50 cm³ zředěného základního roztoku, což odpovídá 0; 0,002; 0,01; 0,02; 0,03 a 0,05 mg kysličníku dusičitého, 5 cm³ roztoku hydroxidu sodného, 5 cm³ činidla pro stanovení dusitanů; doplní se vodou po značku a důkladně se promíchá. Po 4O minutách stání se na spektrofotometru změří absorbance jednotlivých roztoků v kyvetách tloušťky 5 cm při vlnové délce 520 nm proti kontrolnímu roztoku. Ze zjištěných hodnot se vypočítá průměrná absorbance (A) odpovídající koncentrace 1 mg kysličníku dusičitého ve 100 cm³ roztoku, podle vzorce
$A=\frac{l}{n}.\sum _{i=l}^n\frac{A_i}{m},$
kde A_i jsou absorbance jednotlivých roztoků (n=5); i=l, 2.......n);
m_i jim odpovídající koncentrace kysličníku dusičitého v mg/100 cm³ roztoku

19. Vlastní stanovení. Nejpozději do 24 hodin po odběru vzorků se obsah vzorkovnice znovu protřepe. Potom se vzorkovnice otevře a absorpční roztok se zfiltruje papírovým filtrem (bílá páska) do suché kuželové baňky na 50 cm³, přičemž se první podíl filtrátu odstraní. Do odměrné baňky na 100 cm³ se odpipetuje tolik filtrátu, kolik odpovídá nejvýše 0,05 mg kysličníku dusičného, přidá se 5 cm³ činidla pro stanovení dusitanů, doplní se vodou po značku a důkladně se promíchá. Nejméně po 40 minutách stání roztoku se změří na spektrofotometru absorbance roztoku za podmínek uvedených v čl. 18.