1. 4 PRINCIP METODY
Aby se prokázalo, že EC50 je vyšší než 100 mg.l^-1, může se provést limitní zkouška.
Dafnie se vystaví na 48 hodin účinku zkoušené látky přidané v různých koncentracích do vody. Použije-li se doba kratší, zdůvodní se ve zprávě.
Za jinak stejných experimentálních podmínek a v odpovídajícím rozmezí zkoušených koncentrací působí různé koncentrace dané zkoušené látky na schopnost plavání dafnií rozdílně. Při různých koncentracích se pak po uplynutí zkušební doby objeví vždy určité procentuální podíly dafnií neschopných plavání. Koncentrace způsobující neschopnost plavání u 0 % resp. 100 % se získají přímo pozorováním, zatímco hodnota EC₅₀ pro 48 hodin se získá, pokud je to možné, výpočtem.
Při této metodě se používá statický postup. Experimentální roztoky se tedy během doby expozice neobnovují.