1.3. Reakční podmínky pro PCR
Postupuje se podle následujícího programu:
| 1 cyklus: | i) | 3 minuty při teplotě 95 °C (denaturace DNA matrice) |
| 10 cyklů | ii) | 1 minuta při teplotě 95 °C (denaturace DNA matrice) |
| iii) | 1 minuta při teplotě 64 °C (připojení primerů) | |
| iv) | 1 minuta při teplotě 72 °C (prodlužování kopie) | |
| 25 cyklů | v) | 30 sekund při teplotě 95 °C (denaturace DNA matrice) |
| vi) | 30 sekund při teplotě 62 °C (připojení primerů) | |
| vii) | 1 minuta při teplotě 72 °C (prodlužování kopie) | |
| 1 cyklus | viii) | 5 minut při teplotě 72 °C (závěrečná prodlužování) |
| ix) | Udržuje se při teplotě 4 °C |
Poznámka:
Tento program je optimalizován pro použití s tepelným cyklerem MJ Research PTC 200. Při použití jiných modelů může být nutná modifikace kroků cyklů ii), iii) iv), v), vi) a vii).