4.4 Postup

4.4.1 Roztok vzorku
Do odměrné baňky na 100 ml se s přesností na 0,001 g naváží množství zkušebního vzorku (v g) odpovídající očekávanému obsahu formaldehydu asi 150 μg. Doplní se po rysku vodou a zamíchá se (roztok S). (Je nutno ověřit, zda je hodnota pH asi 6; v opačném případě se přidá roztok kyseliny chlorovodíkové (4.2.6).)
Do Erlenmeyerovy baňky na 50 ml se odměří
— 10,00 ml roztoku S,
— 5,00 ml činidla obsahujícího pentan-2,4-dion (4.2.12),
— doplní se demineralizovanou vodou na konečný objem 30 ml.

4.4.2 Standardní roztok
Možný rušivý vliv základního zbarvení zkušebního vzorku se odstraní použitím tohoto referenčního roztoku:
Do Erlenmeyerovy baňky na 50 ml se přidá
— 10,00 ml roztoku S,
— 5,00 ml činidla (4.2.13),
— demineralizovaná voda na konečný objem 30 ml.

4.4.3 Roztok pro slepý pokus
Do Erlenmeyerovy baňky na 50 ml se přidá:
— 5,00 ml činidla obsahujícího pentan-2,4-dion (4.2.12),
— demineralizovaná voda na konečný objem 30 ml.

4.4.4 Stanovení
Poznámka: Všechny tyto operace musí být provedeny do 25 minut od okamžiku, kdy byly Erlenmeyerovy baňky vloženy do lázně vyhřáté na 60 °C.

4.4.4.1 Směsi připravené podle bodů 4.4.1, 4.4.2 a 4.4.3 se protřepou. Erlenmeyerovy baňky se přesně na 10 minut vloží do vodní lázně vyhřáté na 60 °C. Nechají se vychladnout 2 minuty v lázni s ledovou vodou.

4.4.4.2 Obsah se převede do dělicí nálevky na 50 ml obsahující 10,00 ml butan-1-olu (4.2.4). Každá baňka se vypláchne 3 až 5 ml vody. Směs se přesně 30 sekund důkladně třepe. Fáze se nechají oddělit.

4.4.4.3 Obsah se přefiltruje do měřicích kyvet (4.3.2) přes filtr pro separaci fází. Fáze lze rovněž odstředit (při 3000 ot./min po dobu 5 minut).

4.4.4.4 Při 410 nm se změří absorbance (A₁) extraktu roztoku vzorku (4.4.1) proti extraktu standardního roztoku (4.4.2).

4.4.4.5 Obdobně se změří absorbance (A₂) extraktu roztoku slepého pokusu (4.4.3) proti butan-1-olu.

4.4.5 Kalibrační křivka

4.4.5.1 Do Erlenmeyerovy baňky na 50 ml se přidá:
— 5,00 ml zředěného standardního roztoku podle bodu 4.2.15,
— 5,00 ml činidla obsahujícího pentan-2,4-dion (4.2.12),
— demineralizovaná voda na celkový objem 30 ml.

4.4.5.2 Postupuje se tak, jak je popsáno v bodě 4.4.4, a měří se absorbance proti butan-1-olu (4.2.4).

4.4.5.3 Postup se opakuje s 10, 15, 20 a 25 ml zředěného standardního roztoku (4.2.15).

4.4.5.4 Nulová hodnota (odpovídající zabarvení reakčních činidel) se získá postupem podle bodu 4.4.4.5.

4.4.5.5 Po odečtení nulové hodnoty od každé hodnoty absorbance získané podle bodů 4.4.5.1 a 4.4.5.3 se sestrojí kalibrační křivka. Beerův zákon platí až do 30 μg formaldehydu.