B. KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ
1. DEFINICE
Obsah jodičnanu sodného stanovený touto metodou se vyjádří v hmotnostních procentech jodičnanu sodného.
2. PRINCIP
Jodičnan sodný se rozpustí ve vodě a stanoví se pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie se dvěma kolonami v sérii: s kolonou s obrácenou fází C18 a s kolonou plněnou anexem.
3. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE
Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší a zejména musí být vhodné pro vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii (HPLC).
3.1 Kyselina chlorovodíková 4 mol/l
3.2 Siřičitan sodný, 5% vodný roztok (m/V)
3.3 Zásobní roztok jodičnanu sodného
Připraví se zásobní roztok rozpuštěním 50 mg jodičnanu sodného ve 100 ml vody.
3.4 Dihydrogenfosforečnan draselný
3.5 Hydrogenfosforečnan disodný dihydrát
3.6 Mobilní fáze pro HPLC: Rozpustí se 3,88 g dihydrogenfosforečnanu draselného (3.4) a 1,19 g hydrogenfosforečnanu disodného dihydrátu (3.5) v 1 litru vody.
pH tohoto roztoku je 6.2.
3.7 Univerzální indikátorový papírek, pH 1 - 11
4. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
4.1 Obvyklé laboratorní vybavení
4.2 Kulatý filtrační papír, průměr 110 mm, Schleicher and Schüll No. 575, nebo ekvivalentní
4.3 Přístroj pro vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii vybavený detektorem s nastavitelnou vlnovou délkou
4.4 Kolony: Délka: 120 mm, vnitřní průměr: 4,6 mm, počet: 2 kolony v sérii; první kolona: Nucleosil® 5 C18 nebo ekvivalentní; druhá kolona: Vydac™-301-SB nebo ekvivalentní
5. POSTUP
5.1 Příprava vzorku
5.1.1 Kapalné vzorky ( šampony)
Do kalibrované zkumavky na 10 ml se zabroušenou zátkou nebo do odměrné baňky se naváží asi 1,0 g zkušebního vzorku přesně.
Objem se doplní vodou po rysku a promíchá.
V případě potřeby se roztok zfiltruje.
Jodičnany se v roztoku stanoví pomocí HPLC způsobem popsaným v bodě 5.2.
5.1.2 Pevné vzorky (mýdlo)
Část vzorku se jemně nadrtí a do skleněného děleného válce na 100 ml se zabroušenou zátkou se naváží asi 1,0 g zkušebního vzorku přesně. Doplní se vodou na 50 ml a důkladně se třepe 1minutu. Odstředí se a zfiltruje přes filtrační papír (4.2), nebo se ponechá stát alespoň přes noc.
Rosolovitá hmota se důkladně protřepe a zfiltruje přes papírový filtr (4.2).
Jodičnany se ve filtrátu stanoví pomocí HPLC způsobem popsaným v bodě 5.2.
5.2 Chromatografie
Průtok: 1 ml/min.
Vlnová délka detektoru (4.3): 210 nm.
Objem nástřiku: 10 μl.
Měřená veličina: plocha píku.
5.3 Kalibrace
Do odměrných baněk na 50 ml se odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0 a 20,0 ml zásobního roztoku jodičnanu sodného (3.3). Objemy se doplní po rysku a promíchají.
Vzniklé roztoky obsahují 0,01, 0,02, 0,05, 0,1 a 0,20 mg jodičnanu sodného v 1 ml.
Do kolony se nastříkne 10 μl každého standardu a zaznamená se chromatogram. Stanoví se plochy píků jodičnanu a sestrojí se kalibrační křivka závislosti plochy píku na koncentraci jodičnanu sodného.
6. VÝPOČET
Obsah jodičnanu sodného vyjádřený v hmotnostních procentech (m/m) se vypočte ze vzorce:
kde
m = hmotnost zkušebního vzorku (5.1) v g,
V = celkový objem roztoku vzorku získaného podle bodu 5.1 v ml,
c = koncentrace jodičnanu sodného v mg/ml odečtená z kalibrační křivky (5.3).
7. OPAKOVATELNOST
Pro výrobky obsahující asi 0,1 % (m/m) jodičnanu sodného nesmí rozdíl mezi výsledky dvou paralelních stanovení na stejném vzorku překročit absolutní hodnotu 0,002 %.
8. POTVRZENÍ
8.1 Princip
V okyseleném roztoku kosmetického prostředku se jodičnany (IO3-) redukují na jodidy (I-) siřičitanem a výsledný roztok se analyzuje vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií. Jestliže pík s retenčním časem odpovídajícím retenčnímu času jodičnanu po reakci se siřičitanem zmizí, jednalo se s největší pravděpodobností o pík jodičnanů.
8.2 Postup
Do Erlenmeyerovy baňky se odpipetuje 5 ml roztoku vzorku připraveného podle bodu 5.1.
pH roztoku se upraví kyselinou chlorovodíkovou (3.1) na hodnotu 3 nebo nižší; použije se univerzální indikátorový papírek (3.7).
Přidají se tři kapky roztoku siřičitanu sodného (3.2) a roztok se zamíchá.
10 μl roztoku se nastříkne do kolony kapalinového chromatografu (4.3).
Výsledný chromatogram se porovná s chromatogramem zaznamenaným pro stejný vzorek podle oddílu 5.