k vyhlášce č. 471/2000 Sb.
Část I.
PLEMENITBA SKOTU
Část II.
PLEMENITBA KONÍ
Část III.
PLEMENITBA PRASAT
Část IV.
PLEMENITBA OVCÍ A KOZ
1.3 Po odběru je sběrač se spermatem, označený značkou a číslem státního registru plemenného býka, oddělen a předán do laboratoře k hodnocení a zpracování. Mikroskopické posouzení čerstvého spermatu se provádí do 10 minut po odběru.
1.2 Všechny pomůcky přicházející bezprostředně do styku se spermatem musí být sterilní.
Postupy získávání, posuzování a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek
A.
2. Hodnocení spermatu
**) Vzorky jsou odebírány sterilně při teplotě -196 °C a vyšetřovány bezprostředně po rozmrazení.
*) Vzorky jsou odebírány sterilně při teplotě 1 až 3 °C a vyšetřovány bezprostředně po přípravě.
Poznámky:
| Hodnocení: | hodnotí se: | způsob hodnocení: |
|---|---|---|
| čerstvého spermatu | zdravotní nezávadnost spermat u odebíraných býků | nejméně jednou za půl roku veterinárním vyšetřením |
| objem | měřením nebo vážením u každého ejakulátu s přesností na 1 cm3 (g) | |
| barva, konzistence a pach | smyslovým posouzením | |
| obsah přimísenin | smyslovým posouzením ve sběrači a mikroskopicky | |
| hustota spermatu | fotometrem u každého ejakulátu (kontrolní propočty případně kalibrace přístrojů se provádějí v Bűrkerově komůrce) | |
| aktivita spermatu (u každého ejakulátu) | mikroskopicky při zvětšení 1 : 200 až 300 a při teplotě 39 ± 1°C, kdy se odhadem zjišťuje procentické zastoupení spermií pohybujících se vpřed za hlavičkou | |
| výskyt abnormálních spermií | mikroskopicky při zvětšení 1 : 1000 až 1500 a vyjadřuje se v %; u provozních býků nejméně jednou za měsíc | |
| krátkodobě*) uchovávaného spermatu | aktivita spermatu | jako u čerstvého spermatu |
| počet aktivních spermií v inseminační dávce | v 10 čtvercích v Bűrkerově komůrce tak, že průměrný počet spermií ve čtverci se přepočte na velikost inseminační dávky a vynásobením počtu všech spermií procentem aktivity se zjistí počet aktivních spermií v inseminační dávce | |
| dlouhodobě**) uchovávaného spermatu | aktivita spermatu (po rozmražení) | u každého ejakulátu na pracovišti, kde bylo sperma zmraženo a dále u každého ejakulátu před expedicí tak, že: - pejeta se rozmrazí ve vodní lázni o teplotě 39 ± 1 °C (pejeta o obsahu 0,25 ml za 15-20 vteřin, o obsahu 0,50 ml za 20 až 30 vteřin), její obsah se promíchá a vypustí do zkumavky s roztokem citronanu sodného, aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu; - peleta se rozpustí v malé zkumavce o teplotě 39 ± 1 °C v roztoku citronanu sodného a promíchá se; aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu |
| počet aktivních spermií v inseminační dávce | jako u krátkodobě uchovávaného spermatu |
Hodnocení spermatu se provádí na základě posouzení jednotlivých vlastností spermatu podle charakteristických znaků a projevů metabolizmu při teplotě 20 až 25 °C.
1. Odběr spermatu
1.1. Odběr spermatu se provádí podle plánu stanoveného individuálně pro každého býka, po řádném vyčištění býka a omytí a usušení předkožky, pomocí umělé vagíny vyjmuté z termostatu o teplotě cca 40 °C, jejíž vložka je ověřená na nepropustnost vody a vzduchu.
| na 1 ml ředidla | 500 mj streptomycinu |
| 500 mj penicilinu | |
| 150 μg linkomycinu | |
| 300 μg spektinomycinu |
Může být použita i jiná kombinace antibiotik, pokud mají rovnocenný účinek proti kampylobakteriím, leptospirám a mykoplazmám.
3.4. Do spermatu jsou přidávána antibiotika tak, aby v konečném naředění bylo dosaženo nejméně těchto koncentrací:
Poznámka:
4. Uchovávání a výdej inseminačních dávek
| 4.1. | Sperma se po zpracování uchovává | a) krátkodobě při teplotě 1 až 3 °C b) dlouhodobě při teplotě –196 °C | |||
| 4.2 | Krátkodobě uchovávané sperma se vydává z inseminačních stanic podle podmínek daných technologickým postupem | ||||
| 4.3. | Dlouhodobě uchovávané inseminační dávky ve formě pejet nebo pelet se ukládají do provozního kontejneru, kde jsou trvale ponořeny v tekutém dusíku při teplotě -196 °C. Po hodnocení aktivity se inseminační dávky ukládají do zásobního kontejneru a z inseminační stanice se expeduje nejdříve po 30 dnech po odběru a zmrazení. | ||||
| 4.4. | Pejety jsou uloženy | a) | v zásobních kontejnerech v kelímcích s vatovou zátkou dole; v těchto kelímcích jsou uloženy odděleně podle býků a data odběru s vloženým lístkem, na kterém je uvedena značka a číslo státního registru a jméno býka, datum odběru, počet uložených inseminačních dávek. V případě uložení inseminačních dávek z více skoků do kelímků s menším průměrem je tento údaj napsán nesmazatelnou barvou na vnější straně kelímku. Na expediční list jsou vždy uváděna data jednotlivých skoků, počet inseminačních dávek a státní registr býka, | ||
| b) | v transportních kontejnerech zpravidla v kelímcích o malém průměru, na které se uvádí stejné údaje jako v bodě a) a které jsou vždy naplněny tekutým dusíkem, | ||||
| 4.5. | Pelety jsou uloženy | a) | v zásobních kontejnerech v kelímcích, které se ukládají na kovové plošinky v kanystrech a víčka kelímků jsou opatřena třemi až čtyřmi otvory; kelímek je naplněn tak, aby nad peletami bylo asi 7 mm tekutého dusíku, | ||
| b) | v transportních kontejnerech v kovových pouzdrech; nad peletami ie kovové závaží, pouzdra jsou uzavřena víčky a všechny pelety jsou trvale ponořeny v dusíku | ||||
| 4.6. | Kontejnery používané pro skladování a přepravu spermatu jsou náležitě desinfikovány před každým naplněním dusíkem, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu. Interval desinfekce je dán typem a používáním kontejneru. | ||||
3. Zpracovávání spermatu
3.1. Veškeré předměty přicházející do styku se spermatem musí být sterilní.
3.2. Produkty živočišného původu používané při ošetření spermatu musí být zdravotně nezávadné.
3.3. Sperma se ředí při pokojové teplotě 20 až 25 °C; k ředění se používají pouze média, která po konzervaci uchovávají dobrou oplozovací schopnost spermatu a jeho zdravotní nezávadnost; ředí se technologickým postupem podle pokynů výrobce ředidla.
3.5. Bezprostředně po přidávání antibiotik je ředěné sperma uchováváno nejméně 45 minut při teplotě 3 - 5°C
Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek
B.
| kelímek | 1. na vnějším obvodu | a) značka a číslo státního registru býka b) datum odběru |
| 2. dovnitř se vkládá štítek, který obsahuje: | a) číslo státního registru býka b) datum odběru c) počet pelet d) aktivita po rozmrazení | |
| kovové pouzdro | na boční straně | a) značka a číslo státního registru býka b) datum odběru |
2.3. Označení pelet:
| kód plemene | značka státního registru | číslo státního registru | datum odběru spermatu | kód inseminační stanice (kód Evropské unie, případně kód národní) | sérologický status dárce vzhledem k IBR/ IPV |
Poznámka:
Pokud je uváděn národní kód inseminační stanice, uvádí se za ním ISO kód země
Status býka k IBR/IPV se značí písmeny IP v případě, že býk je IBR pozitivní, je-li býk negativní, zůstanou dvě místa volná.
2.2. Označení pejet: Pejeta se zmrazeným spermatem je značena (směrem od zavařeného konce):
2.1. Obal spermatu musí být vždy zřetelně označen značkou a číslem státního registru plemenného býka.
| Čerstvé sperma | a) neobsahuje původce nebezpečných nákaz a nemocí, v intervalu 6 měsíců je laboratorně vyšetřováno na přítomnost patogenních mikroorganismů (včetně patogenních plísní), b) neobsahuje přimíseniny ani shluky spermií, c) má bílou barvu s odstínem šedým až krémovým (dovoleno je žlutavé zabarvení) a ostatní charakteristické vlastnosti (pach a zrnitost), d) hustota nemá být nižší než 700 000 spermií v 1 mm3, e) aktivita spermií je nejméně 70 %, f) obsahuje nejméně 80 % morfologicky normálních spermií a nejvýše 10 % primárních změn. |
| krátkodobě uchovávané sperma | a) vyhovuje ustanovením pro čerstvé sperma a po zředění a konzervování b) neobsahuje patogenní mikroorganizmy, včetně patogenních plísní, c) aktivita spermií před použitím je nejméně 50 %, d) v jedné inseminační dávce je nejméně 10 x 106 aktivních spermií; u býků zlepšovatelů je možno tento počet snížit za předpokladu dobrého zabřezávání |
| dlouhodobě uchovávané sperma | a) po zředění a konzervování vyhovuje požadavkům podle 1.2. písm. a), b) a d), b) aktivita spermií po rozmrazení je nejméně 30 %. |
1. Požadavky na kvalitu:
2. Požadavky na identifikaci:
| účel | technické vybavení |
|---|---|
| odběr spermatu | připouštědlo (v místnosti nebo venku), fantom, termostat, kompletní umělé vagíny, včetně sběračů a tepelné izolace, další pomůcky a prostředky pro odběr spermatu zejména sterilní vazelína, jednorázové rukavice, teploměr, desinfekční prostředky |
| hodnocen spermatu | předvážky, fotometr, mikroskop s fázovým kontrastem a výhřevným stolkem, vodní lázeň, termostat, mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, poloautomatické pipety 25 μl, 50 μl, 100 μl, Bűrkerova počítací komůrka, melanžéry na červené a bílé krvinky, tenkostěnné zkumavky, barvicí kyvety, automatický dávkovač po 10 ml, imerzní olej, diferenciální barviva, potřebné laboratorní sklo |
| zpracování spermatu | termostat, oscilační stolek, chladnice nebo chladící vitrína, zařízení na plnění, zatavování a značení pejet, rampy, širokohrdlém kontejnery s termočlánkem nebo automatickým zmrazovačem, teploměry, ředidla, antibiotika a pejety |
| uložení spermatu | zásobník s rozvody tekutého dusíku, provozní kontejnery, zásobní kontejnery s kanystry pro uložení pejet nebo pelet, transportní kontejnery, kelímky, polystyrénové nádoby na tekutý dusík, rukavice, pomůcky a ochranný štít pro manipulaci s tekutým dusíkem |
| dezinfekce a sterilizace | horkovzdušný sterilizátor, autokláv, desinfekční prostředky, zdroj teplé vody, destilovaná voda a redestilovaná voda |
C.
Technické vybavení inseminační stanice býků
Osoba oprávněná k provozování inseminační stanice vede písemně nebo pomocí elektronických medií:
| druh evidence | obsah: |
|---|---|
| stájová evidence plemenného býka | a) číslo ušní známky, b) číslo státního registru plemenného býka c) datum narození |
| evidence o ustájených býcích | o příjmu býka na stanici, jeho přesunu případně úhynu |
| záznam o odběru býků | a) množství odebraného ejakulátu, b) kvalita odebraného ejakulátu, c) stupeň ředění, d) předpokládaná výroba inseminačních dávek |
| denní záznam o výrobě inseminačních dávek | |
| záznam o morfologickém vyšetření spermatu | zejména výskyt abnormálních spermií |
| záznamy o zásobách a uložení inseminačních dávek | |
| expediční list | záznamy o prodeji nebo přesunu inseminačních dávek |
D.
Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici býků a způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence
5. Inseminační dávky má oprávněná osoba nebo chovatel uloženy v transportním kontejneru. Jeho desinfekce se provádí jednou za 4 měsíce, v případě potřeby častěji. O provedené desinfekci se vedou záznamy.
4. Při inseminaci postupuje osoba oprávněná k provádění inseminace nebo chovatel tak, že dbá o hygienu a dodržuje postup vyšetření a vlastní inseminace plemenic, výsledek inseminace zjišťuje nejpozději do konce 3. kalendářního měsíce po měsíci poslední inseminace (neplatí pro masná plemena a plemenice bez tržní produkce mléka).
3. Před inseminací je dodržován technologický postup přípravy inseminační dávky v
| pejetě | pejeta se rozmrazuje ve vodní lázni o teplotě asi 35 °C s vatovou zátkou dole, s doporučenou dobou rozmrazování 7 vteřin u 0,25 ml pejety a 15 vteřin u 0,5 ml pejety; po rozmrazení a osušení se pejeta zasune do inseminační aparatury tak, že je vatová zátka dole, horní konec pejety se odstřihne a po nasazení krycí pipety se provede zkouška těsnosti, přičemž se dbá, aby nedocházelo k tepelným šokům, |
| v peletě | peleta se samovolně rozmrazuje v samostatné ampulí s citronanem sodným a postupně se nasává inseminační pipetou frakce bez spermií, malé množství vzduchu a frakce bohatá na spermie |
2. Plemenice se inseminují pokud vykazují příznaky říje, nejlépe ve druhé polovině říje. Trvají-li příznaky říje druhý den po inseminaci, může hlásit chovatel plemenici k reinseminaci. Při reinseminaci po dobu 16 dnů od poslední inseminace musí být použito sperma stejného býka..
1. Před inseminací plemenice provede osoba oprávněná nebo chovatel (§ 17 zákona) reprodukční anamnézu, a to zejména:
1.1. po posouzení záznamů v průvodním dokladu plemenice zhodnotí dobu po jejím otelení do ohlášení říje, případně dobu od poslední inseminace,
Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
E.
1.2. z inseminace vyloučí plemenice s nefyziologickým výtokem z pohlavních orgánů, s příznaky nákazy nebo jiného onemocnění, plemenice mimo říji a plemenice neoznačené a přihlíží k hmotnosti jalovice a době po otelení krávy,
**) V případě desinfekce servisním způsobem je k dispozici doklad o jejím provedení.
*) V případě sterilizace servisním způsobem je k dispozici doklad o jejím provedení.
Poznámky:
| kompletní inseminační brašna | která obsahuje účinné desinfekční prostředky, desinfekční mýdlo, teploměr, rukavice jednorázové, vata buničitá, pinzety, kovové inseminační aparatury krycí pipety, v případě používání pelet i skleněné pipety, tlačky a peany, |
| termobox na rozmrazování inseminačních dávek, případně termoláhve, | |
| zdroj teplé vody, | |
| transportní kontejner s vnitřním vybavením | |
| vybavení pro sterilizaci*) | |
| chemikálie na dezinfekci kontejnerů**) |
Technické vybavení pro provádění inseminace
F.
4. Způsob předávání dokladů, včetně jejich oprav, stanoví osoba pověřená vedením ústřední evidence, která zpracovává, vyhodnocuje a zveřejňuje výsledky inseminace.
G.
Obsah a způsob vedení záznamů o inseminaci a jejich předávání osobě pověřené k vedení ústřední evidence
1. Pro každou plemenici je vystaven průvodní list skotu, ve kterém chovatelé a oprávněné osoby vedou záznamy o inseminaci a předávají je osobě pověřené vedením ústřední evidence.
2. Osoba oprávněná k provádění inseminace předává chovateli s vyplněným průvodním listem skotu též pejety použitých inseminačních dávek.
3. Osoba oprávněná k provádění inseminace vede „inseminační výkaz“ písemnou formou nebo pomocí elektronických médií a předává jej do konce kalendářního měsíce následujícího po kalendářním měsíci, v němž byla inseminace provedena, jako vstupní doklad osobě pověřené vedením ústřední evidence.
1.2. Odběr spermatu se provádí způsobem, který v nejvyšší míře zamezuje možnosti mikrobiální kontaminace odebraného spermatu.
1.1. Odběr spermatu se provádí při vzeskoku hřebce na fantom nebo na klisnu pomocí umělé vagíny různého typu, přičemž se získává celý ejakulát nebo jeho frakce.
1.3. Všechny pomůcky, které jsou v přímém kontaktu se spermatem, musí být sterilní, vnitřní vložky umělých vagín musí být sterilizovány v autoklávu nebo zhotoveny z materiálu pro jednorázové použití.
Hodnocení spermatu se provádí u každého ejakulátu nebo jeho frakce.
| Hodnotí se: | způsob hodnocení: |
|---|---|
| aktivita spermií | mikroskopicky subjektivním odhadem při zvětšení 1 : 200 až 300 a teplotě 38 až 40 oC, vyjadřuje se procentem pohyblivých spermií |
| hustota spermatu | fotokolorimetricky nebo počítáním v Bürkerově komůrce, vyjadřuje se počtem spermií v 1 mm3 spermatu |
| množství spermatu | měřením objemu v odměrném válci v ml nebo vážením a přepočtem na cm3 |
| výskyt abnormálních spermií | nejméně každých 30 dní vyhodnocením obarveného preparátu |
| mikrobiologický obraz | kvalitativní a kvantitativní mikrobiologické vyšetření odebraného nativního spermatu, před zařazením do inseminace a nejméně jednou za 6 měsíců |
2. Hodnocení spermatu
1. Odběr spermatu
Postupy získávání, posuzování a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek
A.
4. Výdej a přeprava inseminačních dávek
4.2. Inseminační dávky dlouhodobě konzervovaného spermatu se uchovávají ponořené v tekutém dusíku v kontejnerech, které jsou před každým novým naplněním dusíkem náležitě dezinfikovány.
4.1. Inseminační dávky krátkodobě konzervovaného spermatu se vydávají a přepravují ve speciálních přepravnících, které zajišťují udržení požadované teploty po dobu přepravy.
3.2. Způsob ředění a konzervace:
| krátkodobě konzervované sperma | zdravotně nezávadným ředidlem s přídavkem antibiotik technologickým postupem podle pokynů výrobce použitého ředidla. |
| dlouhodobě konzervované sperma | zdravotně nezávadným ředidlem s přídavkem kryoprotektiv a antibiotik technologickým postupem podle pokynů výrobce použitého ředidla; zředěné sperma rozdělené do inseminačních dávek se zmrazuje v programovatelném zmrazovači nebo v jiném zařízení zajišťujícím kontrolovaný a standardní průběh poklesu teploty zmrazovaného spermatu |
Poznámka:
Způsob zpracování spermatu do pejet znemožňuje dodatečnou kontaminaci spermatu během jeho uchovávání.
| sperma pro krátkodobou konzervaci | a) obsahuje nejméně 50 % aktivních spermií, b) hustota je nejméně 100 000 spermií v 1 mm3, c) objem je nejméně 10 cm3, d) obsahuje 60 % morfologicky normálních spermií při posledním hodnocení, e) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně. |
| sperma pro dlouhodobou konzervaci | a) obsahuje nejméně 70 % aktivních spermií, b) hustota je nejméně 120 000 spermií v 1 mm3, c) objem je nejméně 10 cm3, d) obsahuje nejméně 70 % morfologicky normálních spermií při posledním hodnocení, e) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně. |
3.1. Zpracování spermatu se provádí způsobem vylučujícím jeho dodatečnou mikrobiální kontaminaci a poškození. Sperma před zpracováním splňuje kvalitativní ukazatele:
3. Zpracování spermatu
c) datem odběru spermatu.
Požadavky na kvalitu a identifikaci inseminačních dávek
B.
1. Požadavky na kvalitu
| Inseminační dávka krátkodobě konzervovaného spermatu | a) obsahuje nejméně 50 % aktivních spermií po ředění, b) obsahuje nejméně 300 x 106 aktivních spermií, c) obsahuje nejméně 10 cm3 ředěného ejakulátu d) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně |
| Inseminační dávka dlouhodobě konzervovaného spermatu | a) obsahuje po rozmrazení nejméně 30 % aktivních spermií, b) obsahuje po rozmrazení nejméně 150 x 106 aktivních spermií, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně,. |
2. Požadavky na identifikaci
2.1. Během hodnocení a zpracování spermatu je obal obsahující sperma označen jménem hřebce, od kterého bylo sperma odebráno.
2.2. Obal inseminační dávky krátkodobě i dlouhodobě konzervovaného spermatu je zřetelně označen:
a) jménem a číslem státního registru hřebce,
b) označením laboratoře, která sperma zpracovala,
1. Vybavení inseminační stanice hřebců
| Části inseminační stanice | fyzicky oddělené prostory | technické vybavení: | |
|---|---|---|---|
| provoz hřebců | 1. | stáj pro ustájení hřebců s možností odděleného ustájení nemocných hřebců, | jeden nebo více fantomů na odběr spermatu, kompletní umělé vagíny, přístroj na vodní vysokotlaké čištění, předvážky, fotokolorimetr, Bürkerova komůrka, mikroskop vyhřívaný s fázovým kontrastem, mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, vodní lázeň, centrifuga, chladnička, oscilační stolek, přístroj na popisování pejet, horkovzdušný sterilizátor, autokláv, zařízení na mytí skla a pomůcek teplou vodou, automatický programovatelný zmrazovač, termoboxy pro přepravu krátkodobě konzervovaného spermatu, kontejnery na uchování zmrazeného spermatu, kontejnery na uchování zásoby kapalného dusíku |
| 2. | místnost pro odběr spermatu, | ||
| 3. | laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu, | ||
| 4. | místnost pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek a expedici krátkodobě konzervovaného spermatu, | ||
| 5. | místnost pro skladování a výdej dlouhodobě konzervovaného spermatu | ||
| provoz klisen | 1. | místnost pro provedení inseminace klisen, | klec na fixaci klisny, sonograf, přístroj na vodní vysokotlaké čištění, zařízení na mytí skla a pomůcek, zdroj teplé vody |
| 2. | místnost pro přípravu inseminační dávky a pro mytí, desinfekci a sterilizaci | ||
| 3. | stáj pro ustájení klisen, jsou-li součástí inseminační stanice | ||
| Části reprodukčního centra | fyzicky oddělené prostory | přístroje a pomůcky |
|---|---|---|
| provoz hřebců a klisen | 1. stáj pro ustájení hřebců s možností odděleného ustájení nemocných hřebců, 2. stáj pro ustájení klisen, je-li součástí reprodukčního centra, 3. místnost pro odběr spermatu a inseminaci klisen, popřípadě venkovní připouštědlo, 4. laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu, 5. místnost pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek a expedici krátkodobě konzervovaného spermatu, 6. místnost pro přípravu inseminační dávky a pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek | jeden nebo více fantomů na odběr spermatu, umělé kompletní vagíny předvážky, fotokolorimetr, Bürkerova komůrka, mikroskop vyhřívaný s fázovým kontrastem, vodní lázeň, chladnička, oscilační stolek, horkovzdušný sterilizátor, autokláv, zařízení na mytí skla a pomůcek teplou vodou, termoboxy pro přepravu krátkodobě konzervovaného spermatu, |
2. Vybavení reprodukčního centra koní
3. Vybavení odběrového místa
3.2. zdroj teplé vody.
C.
Technické vybavení inseminační stanice hřebců, reprodukčního centra a odběrového místa
3.1. prostory pro odběr spermatu
Připouštěcí rejstřík hřebce obsahuje 4 průpisové připouštěcí lístky se stejným registračním číslem
| Druh evidence: | obsah: |
|---|---|
| 1. záznam o odběru spermatu | a) číslo státního registru a jméno hřebce, b) datum odběru spermatu a jeho hodnocení, c) počet inseminačních dávek, d) způsob konzervace |
| 2. záznam o výdeji inseminačních dávek | a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) číslo státního registru a jméno hřebce d) datum odběru spermatu, e) počet vydaných inseminačních dávek |
| 3. záznam o plemeníkovi | a) identifikační údaje plemeníka b) potvrzení o původu c) všechny záznamy veterinárního dozoru d) připouštěcí rejstřík hřebce používaného k inseminaci, který vydává osoba pověřená vedením ústřední evidence prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení. |
Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici a v reprodukčních centrech
D.
Krátkodobě konzervovaná inseminační dávka je při výdeji doprovázena průvodní kartou, která obsahuje údaje, uvedené v záznamu o výdeji inseminačních dávek.
| Připouštěcí lístky | obsah |
|---|---|
| první a druhý připouštěcí lístek | a) jméno, identifikační číslo, plemeno, otec a matka, barva a slovní popis zapuštěné klisny, b) jméno, příjmení, název, adresa majitele klisny, c) typ zapuštění (inseminace krátkodobě konzervovaným spermatem, inseminace dlouhodobě konzervovaným spermatem, přirozená plemenitba, embryotransfer), d) jméno a číslo státního registru hřebce, kterým byla klisna zapuštěna, e) označení, ve které plemenné knize je hřebec zapsán, f) datum zapuštění |
| třetí a čtvrtý připouštěcí lístek - hlášení o narození hříběte | obsahují údaje uvedené na prvních dvou připouštěcích lístcích a dále: a) datum narození hříběte, b) pohlaví hříběte, c) údaje o narozeném hříběti (živé, mrtvé, dvojčata), d) grafický popis hříběte (pouze na posledním lístku), e) údaje o reprodukčním cyklu klisny (zmetání, vstřebání plodu, jalová po zapuštění), |
3. Před inseminací je důkladně omyta vulva klisny.
2. Všechny pomůcky, které přijdou do styku se spermatem, musí být sterilní.
1. Inseminace klisen je prováděna způsobem omezujícím v nejvyšší možné míře možnost infekce pohlavních orgánů klisny a přenos nakažlivých chorob.
4. Inseminace se provádí vaginálním způsobem. Doba inseminace se určuje zejména podle palpačního a sonografického posouzení folikulu na vaječníku, viskozity cervikálního hlenu nebo vnějších příznaků říje. Klisny se zjevnými příznaky onemocnění pohlavních orgánů se z inseminace vyloučí.
5. K inseminaci se používají inseminační dávky spermatu splňující podmínky podle bodu B.
Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
E.
| kompletní inseminační brašna | účinné desinfekční prostředky, desinfekční mýdlo, teploměr, rukavice jednorázové, vata buničitá, pinzety, inseminační katetry |
| transportní kontejner | |
| zdroj teplé vody |
Technické vybavení pro provádění inseminace klisen
F.
2. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci zaznamenává údaje o inseminaci a inseminované plemenici:
| Způsob inseminace | způsob vedení záznamů |
|---|---|
| Při inseminaci dlouhodobě konzervovaným spermatem | do připouštěcího rejstříku a chovateli klisny vystaví příslušné 2 připouštěcí lístky |
| Při inseminaci krátkodobě konzervovaným spermatem | do průvodní karty inseminační dávky a chovatel klisny jí vyplněnou zasílá obratem osobě oprávněné k provozování inseminační stanice nebo reprodukčního centra koní, která zaznamená údaje do připouštěcích lístků a vystaví chovateli klisny příslušné 2 připouštěcí lístky |
5. Pro vedení záznamů o inseminaci plemene klusák platí ustanovení části H. odst.5.
4. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci předává zpět vyplněný připouštěcí rejstřík prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence do konce kalendářního roku.
3. Údaje do připouštěcího rejstříku, případně do průvodní karty inseminační dávky, jsou zaznamenány na základě potvrzení o původu nebo průkazu koně. U klisny neregistrované v ústřední evidenci (§ 34 odst. 5 zákona) je uveden její majitel a všechny další známé údaje o klisně.
1. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci obdrží prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení od osoby pověřené vedením ústřední evidence připouštěcí rejstřík (bod D).
G.
Obsah a způsob vedení záznamů o inseminaci, jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence
1. Chovatel zajišťující přirozenou plemenitbu zaznamenává po každém připuštění předepsané údaje podle části D do připouštěcího rejstříku, který obdrží prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení od osoby pověřené vedením ústřední evidence a vystaví majiteli klisny připouštěcí lístky.
7. Druhý lístek je určen pro držitele hřebce.
9. Tento lístek zasílá chovatel prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence do 3 týdnů po ohřebení klisny (u klisen, které nemají živé hříbě nejpozději do 31. 8. v roce následujícím po připuštění)
3. Údaje jsou do připouštěcího rejstříku zaznamenávány na základě potvrzení o původu nebo průkazu koně. U klisny neregistrované v ústřední evidenci (§ 34 odst. 5 zákona) se uvede nejméně její majitel a všechny další známé údaje o klisně.
4. Připouštěcí rejstřík je do konce kalendářního roku vrácen prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence.
H.
Rozsah záznamů o přirozené plemenitbě a způsob jejich předávání osobě pověřené k vedení ústřední evidence
5. Připouštěcí rejstřík u anglického plnokrevníka a klusáka sestává z 3 průpisových připouštěcích lístků se stejným registračním číslem, které obsahují:
| a) název a adresu osoby pověřené vedením ústřední evidence |
| b) název stanice hřebců |
| c) číslo lístku s označením „pro plnokrevný chov“ |
| d) jméno klisny |
| e) rok narození klisny |
| f) základní barvu klisny |
| g) číslo průkazu totožnosti klisny |
| h) jméno a adresu majitele klisny |
| i) jméno hřebce, kterým byla klisna připuštěna |
| j) data připuštění (první a poslední skok v každé říji) |
| k) potvrzení držitele hřebce o tom, že byla provedena kontrola totožnosti klisny podle průkazu totožnosti a že klisna byla připuštěna přirozenou plemenitbou |
| l) datum vystavení lístku |
| m) podpis držitele hřebce |
6. První připouštěcí lístek zůstává v připouštěcím rejstříku a je zaslán osobě pověřené vedením ústřední evidence prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení do 14 dnů po skončení připouštěcí sezóny.
| a) údaje o výsledku připuštění, datum narození, pohlaví a barvu hříběte, | |
| b) datum a podpis majitele klisny |
8. Třetí lístek je určen pro majitele klisny a slouží jako hlášení chovatele o výsledku připouštění a obsahuje vedle údajů uvedených v bodě a) až m):
1. Odběr spermatu
1.3. Sperma se zachytává do opakovaně nebo jednorázově používaných, nespermicidních jímačů a lze jej v průběhu odběru zbavit želatinózní frakce filtrací přes dvojitou sterilizovanou gázu, převlečenou přes ústí jímače. Opakovaně používané jímače spermatu, zpravidla skleněné, a umělé vagíny jsou před dalším použitím umyty a sterilizovány.
1.2. Před odběrem spermatu se u kance očistí vyústění předkožky a jejího okolí nasucho nebo vodou s následným osušením.
1.1. Odběr spermatu se provádí na inseminačních stanicích po vzeskoku kance na fantom, na odběrových místech na fantom nebo na prasnici v říji, a při ejakulaci vyvolané umělou vagínou, temperovanou na tělesnou teplotu, manuální metodou bez umělé vagíny fixací penisu.
2. Hodnocení spermatu
| Hodnotí se | způsob hodnocení |
|---|---|
| barva, pach, konzistence a obsah cizích přimísenin | smyslovým posouzením |
| objem | odměřením v kalibrované nádobě (v ml) nebo zvážením (v g) |
| koncentrace spermií | fotometrem nebo počítací komůrkou na krvinky |
| aktivita spermií | mikroskopicky subjektivním odhadem procenta spermií s přímočarým pohybem dopředu za hlavičkou, při tělesné teplotě vzorku a při zvětšení 1 : 200 –300 |
| výskyt abnormálních spermií | mikroskopicky na obarveném nátěru, nejméně jednou měsíčně (v procentech) |
| přežitelnost spermií | kontrolou aktivity spermií v průběhu doby použitelnosti ředěného konzervovaného spermatu |
| mikrobiologický obraz | vyšetření spermatu nejméně jednou za půl roku |
Postupy získávání, posuzování a zpracování spermatu, uchování a výdeje inseminačních dávek kanců
A.
Inseminační dávky se vydávají pro přepravu ve speciálních k tomu určených termoboxech, které zabezpečují ochranu dávek proti teplotě vnějšího prostředí po celou dobu přepravy až do převzetí dávek odběratelem, v případě zmrazeného spermatu výlučně v kontejnerech s tekutým dusíkem.
4. Uchovávání a výdej inseminačních dávek
| Sperma pro dlouhodobou konzervaci: | a) konzervuje se zmrazováním v parách tekutého dusíku, |
| b) ke spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci, | |
| c) zmrazené sperma se uchovává v peletách a vydává v tubetách nebo se zmrazuje přímo v obalu, zpravidla v pejetách, ve kterých se rovněž uchovává a expeduje. | |
| d) zmrazené sperma v obalech se uchovává ve speciálních kontejnerech, dlouhodobě ponořené v tekutém dusíku, jehož hladina se kontroluje a doplňuje podle intenzity odparu, | |
| e) přežitelnost spermií se zjišťuje před výdejem k inseminaci, bezprostředně po rozmrazení | |
| Sperma pro krátkou dobu použití:. | a) používají se speciální ředidla pro kančí sperma, ředění spermatu se provádí podle návodu, přiloženého k ředidlu výrobcem, |
| b) ředidlo a použité pomůcky pro ředění mají teplotu shodnou s teplotou spermatu ± 1 °C, | |
| c) ředidlo je vždy přiléváno do spermatu, | |
| d) stupeň ředění spermatu se řídí zachováním limitního počtu biologicky aktivních spermií v jedné inseminační dávce, | |
| e) ke spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci, | |
| f) obsah biologicky aktivních spermií v čerstvém nativním spermatu se stanoví znásobením celkového počtu spermií aktivitou a odečtením morfologicky abnormálních spermií z posledního vyšetření od výsledku násobku, | |
| g) po naředění se kontroluje aktivita spermií, | |
| h) z každého odebraného spermatu naředěného pro krátkodobou konzervaci se ponechá kontrolní vzorek o objemu cca 20 ml pro sledování přežitelnosti spermií, | |
| i) naředěné sperma pro krátkodobou konzervaci se dávkuje do nespermicidních jednorázových nádob pro více inseminačních dávek, nebo sáčků, flakónů a tubet pro objem jedné inseminační dávky, | |
| j) naředěné sperma se skladuje v tekutém stavu při teplotě 16 ± 2 °C v chladničkách a termoboxech k tomuto účelu upravených nebo vyrobených, | |
| k) postupný pokles teploty spermatu až k teplotě uchování se ohybuje 3 až 4 °C za hodinu, | |
| l) přežitelnost spermií z každého ejakulátu v kontrolním vzorku ředěného spermatu hodnotí v intervalech násobku 24 hodin, podle deklarované konzervační schopnosti použitého ředidla; přičemž přežitelnost spermií nesmí klesnout pod 50 % za 24 hodin uchování |
3. Zpracování spermatu
2.1. Obaly spermatu při odběru a po celou dobu jeho zpracování jsou označeny registrem kance.
B.
Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek
1. Požadavky na kvalitu:
| čerstvé sperma po odběru | a) mléčná až šedobílá barva a ostatní charakteristické vlastnosti spermatu (konzistence, bez zápachu), b) objem je nejméně 100 ml; u mladých kanců do věku 12 měsíců a u plemene duroc do 18 měsíců nejméně 80 ml, c) hustota je nejméně 150 000 spermií v mm3, d) obsahuje nejméně 70 % aktivních spermií, e) obsahuje nejméně 75 % morfologicky normálních spermií, f) neobsahuje patogenní mikroorganizmy ani masivní nález nepatogenních mikroorganizmů, g) neobsahuje cizí přimíseniny |
| krátkodobě konzervované sperma | a) obsahuje nejméně 1,5 x 109 aktivních spermií v jedné inseminační dávce; b) objem jedné inseminační dávky je nejméně 80 ml, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy, |
| dlouhodobě konzervované sperma | a) aktivita spermií po rozmrazení je nejméně 30 %, b) obsahuje po rozmrazení nejméně 2,5 x 109 aktivních spermií v jedné inseminační dávce, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy, |
2. Požadavky na identifikaci:
2.2. Vzorek pro laboratorní kontrolu přežitelnosti spermií na inseminační stanici (kontrolní vzorek) je označen registrem kance a datem odběru spermatu.
2.3. Inseminační dávky jsou označeny registrem kance a datem odběru spermatu, u velkoobjemových obalů současně počtem inseminačních dávek.
2. Inseminační stanice pro produkci čerstvého a krátkodobě konzervovaného spermatu používaného k inseminaci plemenic v rámci jednoho hospodářství
| Účel (prostory provozně odděleny) | Technické vybavení: |
|---|---|
| prostory, umožňující práci veterinárního lékaře, hygienický a bezpečný odběr spermatu a skladování materiálu, | není specifikováno |
| objekty pro ustájení kanců | Individuální volné kotce, které mají podlahu s protiskluzovou úpravou, snadno omyvatelnou a desinfikovatelnou, jsou zajištěny před stykem plemenných kanců s jinými druhy a kategoriemi zvířat |
| pro ředění spermatu a přípravu inseminačních dávek a jejich výdej pro inseminaci plemenic | zařízením pro temperování laboratoře na provozní teplotu, sterilizovanými, nespermicidními manipulačními pomůckami pro zpracování spermatu, ostatními pomůckami desinfikovanými, zařízením ke sterilizaci pomůcek, případně dalšími přístroji a zařízeními podle používané technologie zpracování spermatu a výroby inseminačních dávek, chladnička s regulací teploty pro uchovávání spermatu |
3. Podmínky, které musí být zajištěny pro odběr spermatu kance na odběrovém místě
3.1. základní zooveterinární podmínky odběru spermatu
3.2. odběr vzorků pro vyšetření čerstvého spermatu
3.3. předředění odebraného spermatu
3.4. přeprava a výdej spermatu na inseminační stanici k rozboru a zpracování inseminačních dávek
3.5. kopie potvrzení o původu dárce spermatu, záznam o odběru, označenými obaly na kontrolní vzorky a sperma
Technické vybavení inseminační stanice prasat a odběrového místa
C.
1. Vybavení inseminační stanice pro získávání spermatu a produkci inseminačních dávek k výdeji mimo hospodářství
| Účel (prostory provozně odděleny) | technické vybavení: |
|---|---|
| provozně administrativní prostory | pro zaměstnance inseminační stanice, nezbytnou administrativu a pro veterinárního lékaře, obsahující též sklad pro laboratorní materiál, léčiva a jiné pomůcky pro provoz inseminační stanice a oddělené od provozní části stanice, |
| objekty pro ustájení kanců | individuálními volnými kotce, které mají podlahu s protiskluzovou úpravou, snadno omyvatelnou a desinfikovatelnou, jsou zajištěny před stykem plemenných kanců s jinými druhy a kategoriemi zvířat; ve stáji kanců nejsou chována jiná zvířata. |
| místnosti pro odběr spermatu | omyvatelnou a desinfikovatelnou pevnou podlahou s protiskluzovou úpravou a omyvatelnými stěnami, fantomem nebo více fantomy, které jsou umístěny samostatně v odběrových hrazených kotcích s únikovým prostorem pro obsluhující zaměstnance, uzavíratelnými mycími a čekacími boxy, |
| laboratoř | omyvatelnou a desinfikovatelnou pevnou podlahou s protiskluzovou úpravou a omyvatelnými stěnami, zdrojem teplé vody, zařízením pro temperování laboratoře na provozní teplotu, sterilizovanými, nespermicidními manipulačními pomůckami pro zpracování spermatu, ostatními pomůckami desinfikovanými, mikroskopem s vyhřívacím stolkem nebo vyhřívací destičkou, předehřívacím stolkem na sklo používané k mikroskopickému hodnocení, zařízením pro hodnocení koncentrace spermií, vodní lázní nebo topným místem s regulací teploty, zařízením ke sterilizaci, případně dalšími přístroji a zařízeními podle používané technologie zpracování spermatu a výroby inseminačních dávek, v případě používání dlouhodobě konzervovaného spermatu kryokonzervací zvláštní místností ke skladování, dobře větratelnou s omyvatelnou a desinfikovatelnou podlahou, ve které jsou umístěny kontejnery se zmrazenými inseminačními dávkami a kontejnery s pohotovostní zásobou kapalného dusíku, |
| prostory k uchovávání inseminačních dávek | chladnička, chladnička s regulací teploty pro uchovávání spermatu |
| prostory pro výdej inseminačních dávek | podávací okénko nebo jiné zařízení pro předávání inseminačních dávek |
| prostory k mytí, desinfekci a skladování dopravních obalů | manipulační stolek s omývatelnou deskou, úložnými prostorami pro desinfekční prostředky a pro uskladnění přepravních obalů, pokud jsou používány |
D.
Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici
| Druh evidence: | obsah evidence: |
|---|---|
| 1. stájová evidence kance | a) ušní číslo kance, b) číslo státního registru kance, c) datum narození kance |
| 2. evidenční karta kance | a) identifikační údaje kance, b) potvrzení o původu, c) všechny záznamy veterinárního dozoru, d) ostatní doklady týkající se kance |
| 3. záznam o odběru spermatu | všechny údaje o hodnoceném spermatu včetně jeho zpracování a kontroly přežitelnosti spermií v chronologickém sledu |
| 4. záznam o výdeji inseminačních dávek | a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) datum odběru spermatu, d) číslo státního registru a linie kanců, e) počet inseminačních dávek |
2. Inseminace se provádí ve stájích prasnic v individuálních nebo skupinových kotcích na základě sledování nástupu říje.
3. Vyhledávání říjících se plemenic se provádí za pomoci kance působícího v přirozené plemenitbě. V chovu bez kance provádí vyhledávání říje osoba, která provádí inseminaci dotykovým testem nebo s použitím kančího feromonu.
E.
Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
1. Inseminační dávky jsou dopravovány v tepelně izolovaných přepravních nádobách vyhovujících technologii konzervace spermatu.
| technické vybavení | |
|---|---|
| místnost pro uložení inseminačních dávek a pomůcek | chladnička s termostatem, který umožňuje udržovat vnitřní teplotu 16 ± 2 °C, nekouřové vytápění, zdroj vody, pracovní stůl a skřín pro ukládání ochranných pracovních prostředků a pomůcek |
| pomůcky pro inseminaci | zavaděče, tepelně izolovaná brašna na přenášení inseminačních dávek a pomůcek do stáje prasnic, buničitá vata a bílá vazelína v tubě, barva pro označování zvířat |
F.
Technické vybavení pro provádění inseminace prasnic
2. při inseminaci prasnic přítomnost kance, kterého fixuje v manipulační chodbě u kotce nebo přímo v kotci pevnými zábranami, odděleně od prasnice,
3. při inseminaci ve skupinových kotcích zabezpečí chovatel oddělení inseminované prasnice od ostatních zvířat, případně pomoc osoby, která oddělí ostatní prasnice v kotci.
1. osobu, která vodí kance k vyhledávání říjících se plemenic; kanec může být též fixován dvěma pevnými zábranami v manipulační chodbě u kotce,
K zajištění inseminace chovatel zabezpečí
Podmínky pro zabezpečení řádného a bezpečného provádění inseminace prasnic
G.
Druh a obsah evidencí o inseminaci prasnic, způsob jejich předávání osobě pověření vedením ústřední evidence
H.
Chovatelé vedou:
Osoba pověřená vedením ústřední evidence přejímá, zpracovává a vyhodnocuje údaje o inseminaci prasnic jen na základě žádosti chovatele, jemuž předává vyhodnocené údaje v dohodnutých termínech a za smluvních podmínek.
| druh evidence: | obsah evidence: |
|---|---|
| 1. stájová evidence plemenice | a) ušní číslo, b) matriční nebo pořadové číslo, c) datum narození, d) datum posledního porodu plemenice, |
| 2. evidenční karta plemenice | a) původové číslo zvířete b) matriční nebo pořadové číslo plemenice, c) datum narození, d) datum zapuštění, po kterém plemenice zabřezla, d) číslo státních registrů připouštěných plemeníků, e) datum každého porodu, f) počty všech a živě narozených selat |
| Krátkodobě uchovávané sperma | beraní sperma | při teplotě 16 až 22 °C při ředění homogenizovaným mlékem |
| kozlí sperma | při teplotě 1až 3 °C při ředění žloutkocitronanovým ředidlem | |
| Dlouhodobě uchovávané sperma | při teplotě –196 °C v tekutém dusíku, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu | |
4. Uchovávání a ředění spermatu
5. Výdej inseminačních dávek
| Inseminační dávky s krátkodobým použitím | vydávají se podle podmínek daných technologickým postupem; | |
| ředěné beraní sperma | vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 16 až 22 °C, | |
| ředěné kozlí sperma | vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 1 až 3 °C | |
| Zmrazené inseminační dávky | vydávají se v kontejnerech v tekutém dusíku, které jsou uvnitř uzpůsobeny použité technologii zmrazování v peletách nebo pejetách a náležitě desinfikovány před každým naplněním tekutým dusíkem, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu, přičemž interval desinfekce je dán typem a používáním kontejneru | |
3.5. Do spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci
3.4. Sperma se ředí při laboratorní teplotě 20 až 25 °C, k ředění se používají pouze média, která po konzervaci uchovávají dobrou oplozovací schopnost spermatu a jeho zdravotní nezávadnost a ředí se technologickým postupem podle pokynů výrobce ředidla.,
3.3. Produkty živočišného původu používané při ošetření spermatu jsou zdravotně nezávadné.
1.1. Odběr spermatu u beranů a kozlů se provádí po očištění plemeníka a omytí a osušení předkožky, pomocí umělé vagíny, vyjmuté z termostatu o teplotě 41 až 43 °C, s frekvencí odběru v době připouštěcí sezóny u starších beranů 4 a vícekrát týdně, u mladších 2 až 3 krát týdně, u kozlů starších jednoho roku 4 a vícekrát týdně, u mladších s nižší frekvencí podle kondice.
1.2. Po odběru je sběrač s čerstvým spermatem, označený značkou a číslem státního registru plemeníka, oddělen a předán do laboratoře k hodnocení kvality.
3.1. Ke zpracování spermatu se používají ejakuláty, které odpovídají požadavkům uvedeným v bodě B.
1.3. Vzorky k mikroskopickému posouzení jsou získávány sterilními pomůckami do 10 minut po odběru.
3.2. Veškeré předměty přicházející do styku se spermatem musí být sterilní.
1. Odběr spermatu
A.
Postupy získávání, posuzování, a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek
| Hodnocení: | hodnotí se: | způsob hodnocení: | |
|---|---|---|---|
| čerstvé sperma | zdravotní nezávadnost spermatu | nejméně jednou za půl roku veterinárním vyšetřením | |
| objem | měřením nebo vážením s přesností na 0,1 cm3 (0,1 g) | ||
| barva, konzistence, pach a obsah přimísenin | smyslovým posouzením | ||
| hustota spermatu | fotometricky u každého ejakulátu (kontrolní propočty, případně kalibrace přístrojů se provádějí v Bürkerově komůrce) | ||
| aktivita spermatu | mikroskopicky u každého ejakulátu při zvětšení 1: 200 až 300 a při teplotě 39 ± 1°C, kdy se zjišťuje odhadem procentické zastoupení spermií pohybujících se vpřed za hlavičkou | ||
| výskyt abnormálních spermií | mikroskopicky při zvětšení 1 : 1000 až 1500 a vyjadřuje se v %, u provozních beranů a kozlů nejméně jednou za měsíc | ||
| krátkodobě uchovávané sperma | aktivita spermatu*) | jako u čerstvého spermatu | |
| počet aktivních spermií v inseminační dávce | v 10 čtvercích v Bürkerově komůrce tak, že průměrný počet spermií ve čtverci se přepočte na velikost inseminační dávky a vynásobením počtu všech spermií procentem aktivity se zjistí počet aktivních spermií v inseminační dávce, | ||
| přežitelnost | tepelným testem | ||
| 1. u beraního spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu ve zkumavce se vloží do vodní lázně o teplotě 45 ± 1 °C, za 30 minut se ke spermatu přidá 1 cm3 citronanu sodného zahřátého na teplotu 39 ± 1 °C a aktivita se posoudí jako u čerstvého spermatu, | |||
| 2. u kozlího spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu se ve zkumavce s 1 cm3 fyziologického roztoku NaCl inkubuje ve vodní lázni o teplotě 47,5 °C po dobu 10 minut a po této době se hodnotí aktivita jako u čerstvého spermatu | |||
| dlouhodobě uchovávané sperma**) | aktivita spermií**) | peleta beraního spermatu | vloží se do malé zkumavky předehřáté asi na 40 °C a ve vodní lázni se rozmrazí „na sucho“, poté se přidá 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, |
| peleta kozlího spermatu | rozmrazí se v 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, | ||
| pejeta | rozmrazí se ve vodní lázni o teplotě 39 ± 1 °C, její obsah se promíchá a vypustí do zkumavky s roztokem citronanu sodného a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, | ||
| počet aktivních spermií | jako u krátkodobě uchovávaného spermatu | ||
| přežitelnost rozmrazeného beraního spermatu | tepelným testem tak, že se peleta rozmrazí „na sucho“ ve zkumavce ve vodní lázni o teplotě 45 ± 1 °C po dobu 30 minut, poté se přidá k rozmrazené peletě 1,0 cm3 roztoku citronanu sodného o teplotě 45 ± 1 °C a poté se aktivita hodnotí jako u čerstvého spermatu | ||
***) u každého ejakulátu na pracovišti, kde bylo sperma zmraženo a u každého ejakulátu před expedicí
**) vzorky se odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po rozmrazení
*) u každého naředěného ejakulátu se vzorky odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po přípravě
2. Hodnocení spermatu
Hodnocení spermatu se provádí posouzením jednotlivých vlastností spermatu podle charakteristických znaků a projevů metabolizmu při pokojové teplotě 20 až 25 °C.
Poznámky:
3. Zpracování spermatu
Obal spermatu při odběru, zpracování, uchovávání a transportu je vždy zřetelně označen státním registrem plemeníka.
2. Požadavky na identifikaci:
B.
Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek
| čerstvé sperma | a) neobsahuje patogenní mikroorganizmy (včetně patogenních plísní) a původce nebezpečných nákaz a nemocí, |
| b) neobsahuje přimíseniny ani shluky spermií, | |
| c) hustota je nejméně u beraního spermatu 2,5 x 106 spermií v 1 mm3 a u kozlího spermatu 2,8 x 106 spermií v 1 mm3, | |
| d) aktivita spermií je nejméně u beraního spermatu 60 % a u kozlího spermatu, 70,0% | |
| e) morfologicky normálních spermií je u beraního spermatu nejméně 80 % a u kozlího spermatu,85 % | |
| krátkodobě uchovávané sperma | vyhovuje ustanovením pro čerstvé sperma a po ředění a konzervování: |
| a) je aktivita spermií nejméně 60 %, | |
| b) v jedné inseminační dávce beraního spermatu je nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií | |
| dlouhodobě uchovávané sperma | vyhovuje požadavkům pro čerstvé sperma a po ředění a konzervován: |
| a) je aktivita spermií po rozmrazení u beraního spermatu nejméně 25 % a u kozlího spermatu nejméně 30 % | |
| b) je v jedné inseminační dávce beraního spermatu nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií |
1. Požadavky na kvalitu:
Technické vybavení inseminační stanice a odběrového místa ovcí a koz
Vybavení odběrového místa
Odběrové místo splňuje podmínky ustájení a požadavky na technické vybavení, kterými lze zajistit hygienický odběr spermatu, jeho zpracování a uložení.
| Část inseminační stanice | technické vybavení: |
|---|---|
| Prostory pro ustájení | plemenní berani jsou ustájeni v kotcích s plochou 3,5 m2 na kus se stálým přívodem pitné vody do automatických napáječek a krmnými žlaby, kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy |
| plemenní kozli jsou ustájeni v indidviduálních kotcích s plochou nejméně 3,5 m2 a s neprůhlednými bočními stěnami; kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy | |
| Prostory pro odběr spermatu | připouštědlo (v místnosti nebo venku), kompletní umělé vagíny, včetně sběračů a tepelné izolace, pomůcky a prostředky pro odběr spermatu (sterilní vazelína, jednorázové rukavice, teploměr, dezinfekční prostředky) |
| Laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu | mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, mikroskopem s fázovým kontrastem, fotometr, termostat, Bürkerova počítací komůrka, termostat, chladnice nebo chladící vitrína, zařízení na plnění, zatavování a značení pejet, rampay, širokohrdlé kontejnery s termočlánkem nebo automatickým zmrazovačem, teploměry, ředidla, antibiotika, pejety |
| Prostory pro dezinfekci a sterilizaci | horkovzdušný sterilizátor a desinfekční chemikálie, zdroj teplé vody*) |
| Prostory pro uložení inseminačních dávek | provozní kontejnery, zásobní kontejnery pro uložení pejet nebo pelet, transportní kontejnery, polystyrénové nádoby na tekutý dusík, rukavice, pomůcky a ochranný štít pro manipulaci s tekutým dusíkem |
C.
D.
Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici
| druh evidence: | obsah evidence: |
|---|---|
| 1.stájová evidence plemeníka | a) ušní číslo, b) číslo státního registru plemeníka, c) plemeno a datum narození plemeníka |
| 2. evidenční karta plemeníka | a) identifikační údaje plemeníka, b)záznamy veterinárního dozoru, c) ostatní doklady týkající se plemeníka |
| 3. záznam o odběru spermatu | všechny údaje o hodnoceném spermatu včetně jeho zpracování a kontroly přežitelnosti spermií v chronologickém sledu |
| 4. záznam o výdeji inseminačních dávek | a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) datum odběru spermatu, d) číslo státního registru a linie plemeníků, e) počet inseminačních dávek |
3. K inseminaci se používá jen sperma splňující stanovené podmínky, při dodržení technologického postupu přípravy inseminační dávky.
Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
E.
4. Při inseminaci postupuje oprávněná osoba nebo chovatel tak, že:
2. Říjící se ovce nebo kozy jsou vybírány zpravidla s pomocí plemeníka, který působí v přirozené plemenitbě. Inseminace ovcí se provádí od poloviny do začátku třetí třetiny říje, mezi 12 až 18 hodinou říje, u koz zpravidla 10 až 12 hodin od nástupu říje.
4.1. dbá o hygienu inseminace,
4.2. inseminaci provádí v připouštědlech,
1. Před inseminací plemenice provede osoba oprávněná nebo chovatel provádějící inseminaci reprodukční anamnézu: po posouzení záznamů v dokladu plemenice zhodnotí dobu po jejím obahnění nebo okozlení do ohlášení říje, případně dobu od poslední inseminace a z inseminace vyloučí plemenice s nefyziologickým výtokem z pohlavních orgánů, s příznaky nákazy nebo jiného onemocnění, plemenice mimo říji a plemenice neoznačené.
4.3. dodržuje správný postup inseminace ovcí a koz čerstvým nebo zmraženým spermatem.
Technické vybavení pro provádění inseminace ovcí a koz (podle druhu inseminačních dávek)
F.
1. spekulum s vnitřním osvětlením,
2. skleněné nebo jednorázové plastové pipety,
3. výtlačné gumové balonky nebo jednorázové injekční stříkačky,
4. transportní kontejner s vnitřním vybavením,
5. parafinový olej, líh, vata a nůžky.
1. Chovatelé vedou stájový zápisník plemenic zařazených do inseminace, do kterého zaznamenávají ušní čísla a data narození plemenic a osoby oprávněné a chovatelé provádějící inseminaci do něj zaznamenávají údaje o každé inseminaci.
2. Osoba pověřená vedením ústřední evidence přejímá, zpracovává a vyhodnocuje údaje o inseminaci bahnic jen na základě žádosti chovatele, jemuž předává vyhodnocené údaje v dohodnutých termínech a za smluvních podmínek.
G.
Druh a obsah záznamů o inseminaci, způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence