Část II.
PLEMENITBA KONÍ
A. Postupy získávání, posuzování a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek
1. Odběr spermatu
1.1. Odběr spermatu se provádí při vzeskoku hřebce na fantom nebo na klisnu pomocí umělé vagíny různého typu, přičemž se získává celý ejakulát nebo jeho frakce.
1.2. Odběr spermatu se provádí způsobem, který v nejvyšší míře zamezuje možnosti mikrobiální kontaminace odebraného spermatu.
1.3. Všechny pomůcky, které jsou v přímém kontaktu se spermatem, musí být sterilní, vnitřní vložky umělých vagín musí být sterilizovány v autoklávu nebo zhotoveny z materiálu pro jednorázové použití.
2. Hodnocení spermatu
Hodnocení spermatu se provádí u každého ejakulátu nebo jeho frakce.
| Hodnotí se: | způsob hodnocení: |
|---|---|
| aktivita spermií | mikroskopicky subjektivním odhadem při zvětšení 1 : 200 až 300 a teplotě 38 až 40 oC, vyjadřuje se procentem pohyblivých spermií |
| hustota spermatu | fotokolorimetricky nebo počítáním v Bürkerově komůrce, vyjadřuje se počtem spermií v 1 mm3 spermatu |
| množství spermatu | měřením objemu v odměrném válci v ml nebo vážením a přepočtem na cm3 |
| výskyt abnormálních spermií | nejméně každých 30 dní vyhodnocením obarveného preparátu |
| mikrobiologický obraz | kvalitativní a kvantitativní mikrobiologické vyšetření odebraného nativního spermatu, před zařazením do inseminace a nejméně jednou za 6 měsíců |
3. Zpracování spermatu
3.1. Zpracování spermatu se provádí způsobem vylučujícím jeho dodatečnou mikrobiální kontaminaci a poškození. Sperma před zpracováním splňuje kvalitativní ukazatele:
| sperma pro krátkodobou konzervaci | a) obsahuje nejméně 50 % aktivních spermií, b) hustota je nejméně 100 000 spermií v 1 mm3, c) objem je nejméně 10 cm3, d) obsahuje 60 % morfologicky normálních spermií při posledním hodnocení, e) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně. |
| sperma pro dlouhodobou konzervaci | a) obsahuje nejméně 70 % aktivních spermií, b) hustota je nejméně 120 000 spermií v 1 mm3, c) objem je nejméně 10 cm3, d) obsahuje nejméně 70 % morfologicky normálních spermií při posledním hodnocení, e) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně. |
3.2. Způsob ředění a konzervace:
| krátkodobě konzervované sperma | zdravotně nezávadným ředidlem s přídavkem antibiotik technologickým postupem podle pokynů výrobce použitého ředidla. |
| dlouhodobě konzervované sperma | zdravotně nezávadným ředidlem s přídavkem kryoprotektiv a antibiotik technologickým postupem podle pokynů výrobce použitého ředidla; zředěné sperma rozdělené do inseminačních dávek se zmrazuje v programovatelném zmrazovači nebo v jiném zařízení zajišťujícím kontrolovaný a standardní průběh poklesu teploty zmrazovaného spermatu |
Poznámka:
Způsob zpracování spermatu do pejet znemožňuje dodatečnou kontaminaci spermatu během jeho uchovávání.
4. Výdej a přeprava inseminačních dávek
4.1. Inseminační dávky krátkodobě konzervovaného spermatu se vydávají a přepravují ve speciálních přepravnících, které zajišťují udržení požadované teploty po dobu přepravy.
4.2. Inseminační dávky dlouhodobě konzervovaného spermatu se uchovávají ponořené v tekutém dusíku v kontejnerech, které jsou před každým novým naplněním dusíkem náležitě dezinfikovány.
B. Požadavky na kvalitu a identifikaci inseminačních dávek
1. Požadavky na kvalitu
| Inseminační dávka krátkodobě konzervovaného spermatu | a) obsahuje nejméně 50 % aktivních spermií po ředění, b) obsahuje nejméně 300 x 106 aktivních spermií, c) obsahuje nejméně 10 cm3 ředěného ejakulátu d) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně |
| Inseminační dávka dlouhodobě konzervovaného spermatu | a) obsahuje po rozmrazení nejméně 30 % aktivních spermií, b) obsahuje po rozmrazení nejméně 150 x 106 aktivních spermií, c) neobsahuje patogenní mikroorganizmy a plísně,. |
2. Požadavky na identifikaci
2.1. Během hodnocení a zpracování spermatu je obal obsahující sperma označen jménem hřebce, od kterého bylo sperma odebráno.
2.2. Obal inseminační dávky krátkodobě i dlouhodobě konzervovaného spermatu je zřetelně označen:
a) jménem a číslem státního registru hřebce,
b) označením laboratoře, která sperma zpracovala,
c) datem odběru spermatu.
C. Technické vybavení inseminační stanice hřebců, reprodukčního centra a odběrového místa
1. Vybavení inseminační stanice hřebců
| Části inseminační stanice | fyzicky oddělené prostory | technické vybavení: | |
|---|---|---|---|
| provoz hřebců | 1. | stáj pro ustájení hřebců s možností odděleného ustájení nemocných hřebců, | jeden nebo více fantomů na odběr spermatu, kompletní umělé vagíny, přístroj na vodní vysokotlaké čištění, předvážky, fotokolorimetr, Bürkerova komůrka, mikroskop vyhřívaný s fázovým kontrastem, mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, vodní lázeň, centrifuga, chladnička, oscilační stolek, přístroj na popisování pejet, horkovzdušný sterilizátor, autokláv, zařízení na mytí skla a pomůcek teplou vodou, automatický programovatelný zmrazovač, termoboxy pro přepravu krátkodobě konzervovaného spermatu, kontejnery na uchování zmrazeného spermatu, kontejnery na uchování zásoby kapalného dusíku |
| 2. | místnost pro odběr spermatu, | ||
| 3. | laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu, | ||
| 4. | místnost pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek a expedici krátkodobě konzervovaného spermatu, | ||
| 5. | místnost pro skladování a výdej dlouhodobě konzervovaného spermatu | ||
| provoz klisen | 1. | místnost pro provedení inseminace klisen, | klec na fixaci klisny, sonograf, přístroj na vodní vysokotlaké čištění, zařízení na mytí skla a pomůcek, zdroj teplé vody |
| 2. | místnost pro přípravu inseminační dávky a pro mytí, desinfekci a sterilizaci | ||
| 3. | stáj pro ustájení klisen, jsou-li součástí inseminační stanice | ||
2. Vybavení reprodukčního centra koní
| Části reprodukčního centra | fyzicky oddělené prostory | přístroje a pomůcky |
|---|---|---|
| provoz hřebců a klisen | 1. stáj pro ustájení hřebců s možností odděleného ustájení nemocných hřebců, 2. stáj pro ustájení klisen, je-li součástí reprodukčního centra, 3. místnost pro odběr spermatu a inseminaci klisen, popřípadě venkovní připouštědlo, 4. laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu, 5. místnost pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek a expedici krátkodobě konzervovaného spermatu, 6. místnost pro přípravu inseminační dávky a pro mytí, desinfekci a sterilizaci pomůcek | jeden nebo více fantomů na odběr spermatu, umělé kompletní vagíny předvážky, fotokolorimetr, Bürkerova komůrka, mikroskop vyhřívaný s fázovým kontrastem, vodní lázeň, chladnička, oscilační stolek, horkovzdušný sterilizátor, autokláv, zařízení na mytí skla a pomůcek teplou vodou, termoboxy pro přepravu krátkodobě konzervovaného spermatu, |
3. Vybavení odběrového místa
3.1. prostory pro odběr spermatu
3.2. zdroj teplé vody.
D. Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici a v reprodukčních centrech
| Druh evidence: | obsah: |
|---|---|
| 1. záznam o odběru spermatu | a) číslo státního registru a jméno hřebce, b) datum odběru spermatu a jeho hodnocení, c) počet inseminačních dávek, d) způsob konzervace |
| 2. záznam o výdeji inseminačních dávek | a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) číslo státního registru a jméno hřebce d) datum odběru spermatu, e) počet vydaných inseminačních dávek |
| 3. záznam o plemeníkovi | a) identifikační údaje plemeníka b) potvrzení o původu c) všechny záznamy veterinárního dozoru d) připouštěcí rejstřík hřebce používaného k inseminaci, který vydává osoba pověřená vedením ústřední evidence prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení. |
Připouštěcí rejstřík hřebce obsahuje 4 průpisové připouštěcí lístky se stejným registračním číslem
| Připouštěcí lístky | obsah |
|---|---|
| první a druhý připouštěcí lístek | a) jméno, identifikační číslo, plemeno, otec a matka, barva a slovní popis zapuštěné klisny, b) jméno, příjmení, název, adresa majitele klisny, c) typ zapuštění (inseminace krátkodobě konzervovaným spermatem, inseminace dlouhodobě konzervovaným spermatem, přirozená plemenitba, embryotransfer), d) jméno a číslo státního registru hřebce, kterým byla klisna zapuštěna, e) označení, ve které plemenné knize je hřebec zapsán, f) datum zapuštění |
| třetí a čtvrtý připouštěcí lístek - hlášení o narození hříběte | obsahují údaje uvedené na prvních dvou připouštěcích lístcích a dále: a) datum narození hříběte, b) pohlaví hříběte, c) údaje o narozeném hříběti (živé, mrtvé, dvojčata), d) grafický popis hříběte (pouze na posledním lístku), e) údaje o reprodukčním cyklu klisny (zmetání, vstřebání plodu, jalová po zapuštění), |
Krátkodobě konzervovaná inseminační dávka je při výdeji doprovázena průvodní kartou, která obsahuje údaje, uvedené v záznamu o výdeji inseminačních dávek.
E. Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
1. Inseminace klisen je prováděna způsobem omezujícím v nejvyšší možné míře možnost infekce pohlavních orgánů klisny a přenos nakažlivých chorob.
2. Všechny pomůcky, které přijdou do styku se spermatem, musí být sterilní.
3. Před inseminací je důkladně omyta vulva klisny.
4. Inseminace se provádí vaginálním způsobem. Doba inseminace se určuje zejména podle palpačního a sonografického posouzení folikulu na vaječníku, viskozity cervikálního hlenu nebo vnějších příznaků říje. Klisny se zjevnými příznaky onemocnění pohlavních orgánů se z inseminace vyloučí.
5. K inseminaci se používají inseminační dávky spermatu splňující podmínky podle bodu B.
F. Technické vybavení pro provádění inseminace klisen
| kompletní inseminační brašna | účinné desinfekční prostředky, desinfekční mýdlo, teploměr, rukavice jednorázové, vata buničitá, pinzety, inseminační katetry |
| transportní kontejner | |
| zdroj teplé vody |
G. Obsah a způsob vedení záznamů o inseminaci, jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence
1. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci obdrží prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení od osoby pověřené vedením ústřední evidence připouštěcí rejstřík (bod D).
2. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci zaznamenává údaje o inseminaci a inseminované plemenici:
| Způsob inseminace | způsob vedení záznamů |
|---|---|
| Při inseminaci dlouhodobě konzervovaným spermatem | do připouštěcího rejstříku a chovateli klisny vystaví příslušné 2 připouštěcí lístky |
| Při inseminaci krátkodobě konzervovaným spermatem | do průvodní karty inseminační dávky a chovatel klisny jí vyplněnou zasílá obratem osobě oprávněné k provozování inseminační stanice nebo reprodukčního centra koní, která zaznamená údaje do připouštěcích lístků a vystaví chovateli klisny příslušné 2 připouštěcí lístky |
3. Údaje do připouštěcího rejstříku, případně do průvodní karty inseminační dávky, jsou zaznamenány na základě potvrzení o původu nebo průkazu koně. U klisny neregistrované v ústřední evidenci (§ 34 odst. 5 zákona) je uveden její majitel a všechny další známé údaje o klisně.
4. Oprávněná osoba nebo chovatel provádějící inseminaci předává zpět vyplněný připouštěcí rejstřík prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence do konce kalendářního roku.
5. Pro vedení záznamů o inseminaci plemene klusák platí ustanovení části H. odst.5.
H. Rozsah záznamů o přirozené plemenitbě a způsob jejich předávání osobě pověřené k vedení ústřední evidence
1. Chovatel zajišťující přirozenou plemenitbu zaznamenává po každém připuštění předepsané údaje podle části D do připouštěcího rejstříku, který obdrží prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení od osoby pověřené vedením ústřední evidence a vystaví majiteli klisny připouštěcí lístky.
3. Údaje jsou do připouštěcího rejstříku zaznamenávány na základě potvrzení o původu nebo průkazu koně. U klisny neregistrované v ústřední evidenci (§ 34 odst. 5 zákona) se uvede nejméně její majitel a všechny další známé údaje o klisně.
4. Připouštěcí rejstřík je do konce kalendářního roku vrácen prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence.
5. Připouštěcí rejstřík u anglického plnokrevníka a klusáka sestává z 3 průpisových připouštěcích lístků se stejným registračním číslem, které obsahují:
| a) název a adresu osoby pověřené vedením ústřední evidence |
| b) název stanice hřebců |
| c) číslo lístku s označením „pro plnokrevný chov“ |
| d) jméno klisny |
| e) rok narození klisny |
| f) základní barvu klisny |
| g) číslo průkazu totožnosti klisny |
| h) jméno a adresu majitele klisny |
| i) jméno hřebce, kterým byla klisna připuštěna |
| j) data připuštění (první a poslední skok v každé říji) |
| k) potvrzení držitele hřebce o tom, že byla provedena kontrola totožnosti klisny podle průkazu totožnosti a že klisna byla připuštěna přirozenou plemenitbou |
| l) datum vystavení lístku |
| m) podpis držitele hřebce |
6. První připouštěcí lístek zůstává v připouštěcím rejstříku a je zaslán osobě pověřené vedením ústřední evidence prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení do 14 dnů po skončení připouštěcí sezóny.
7. Druhý lístek je určen pro držitele hřebce.
8. Třetí lístek je určen pro majitele klisny a slouží jako hlášení chovatele o výsledku připouštění a obsahuje vedle údajů uvedených v bodě a) až m):
| a) údaje o výsledku připuštění, datum narození, pohlaví a barvu hříběte, | |
| b) datum a podpis majitele klisny |
9. Tento lístek zasílá chovatel prostřednictvím uznaného chovatelského sdružení osobě pověřené vedením ústřední evidence do 3 týdnů po ohřebení klisny (u klisen, které nemají živé hříbě nejpozději do 31. 8. v roce následujícím po připuštění)