Část IV.
PLEMENITBA OVCÍ A KOZ
A. Postupy získávání, posuzování, a zpracování spermatu, uchovávání a výdeje inseminačních dávek
1. Odběr spermatu
1.1. Odběr spermatu u beranů a kozlů se provádí po očištění plemeníka a omytí a osušení předkožky, pomocí umělé vagíny, vyjmuté z termostatu o teplotě 41 až 43 °C, s frekvencí odběru v době připouštěcí sezóny u starších beranů 4 a vícekrát týdně, u mladších 2 až 3 krát týdně, u kozlů starších jednoho roku 4 a vícekrát týdně, u mladších s nižší frekvencí podle kondice.
1.2. Po odběru je sběrač s čerstvým spermatem, označený značkou a číslem státního registru plemeníka, oddělen a předán do laboratoře k hodnocení kvality.
1.3. Vzorky k mikroskopickému posouzení jsou získávány sterilními pomůckami do 10 minut po odběru.
2. Hodnocení spermatu
Hodnocení spermatu se provádí posouzením jednotlivých vlastností spermatu podle charakteristických znaků a projevů metabolizmu při pokojové teplotě 20 až 25 °C.
| Hodnocení: | hodnotí se: | způsob hodnocení: | |
|---|---|---|---|
| čerstvé sperma | zdravotní nezávadnost spermatu | nejméně jednou za půl roku veterinárním vyšetřením | |
| objem | měřením nebo vážením s přesností na 0,1 cm3 (0,1 g) | ||
| barva, konzistence, pach a obsah přimísenin | smyslovým posouzením | ||
| hustota spermatu | fotometricky u každého ejakulátu (kontrolní propočty, případně kalibrace přístrojů se provádějí v Bürkerově komůrce) | ||
| aktivita spermatu | mikroskopicky u každého ejakulátu při zvětšení 1: 200 až 300 a při teplotě 39 ± 1°C, kdy se zjišťuje odhadem procentické zastoupení spermií pohybujících se vpřed za hlavičkou | ||
| výskyt abnormálních spermií | mikroskopicky při zvětšení 1 : 1000 až 1500 a vyjadřuje se v %, u provozních beranů a kozlů nejméně jednou za měsíc | ||
| krátkodobě uchovávané sperma | aktivita spermatu*) | jako u čerstvého spermatu | |
| počet aktivních spermií v inseminační dávce | v 10 čtvercích v Bürkerově komůrce tak, že průměrný počet spermií ve čtverci se přepočte na velikost inseminační dávky a vynásobením počtu všech spermií procentem aktivity se zjistí počet aktivních spermií v inseminační dávce, | ||
| přežitelnost | tepelným testem | ||
| 1. u beraního spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu ve zkumavce se vloží do vodní lázně o teplotě 45 ± 1 °C, za 30 minut se ke spermatu přidá 1 cm3 citronanu sodného zahřátého na teplotu 39 ± 1 °C a aktivita se posoudí jako u čerstvého spermatu, | |||
| 2. u kozlího spermatu tak, že 0,1 cm3 ředěného spermatu se ve zkumavce s 1 cm3 fyziologického roztoku NaCl inkubuje ve vodní lázni o teplotě 47,5 °C po dobu 10 minut a po této době se hodnotí aktivita jako u čerstvého spermatu | |||
| dlouhodobě uchovávané sperma**) | aktivita spermií**) | peleta beraního spermatu | vloží se do malé zkumavky předehřáté asi na 40 °C a ve vodní lázni se rozmrazí „na sucho“, poté se přidá 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, |
| peleta kozlího spermatu | rozmrazí se v 1,0 cm3 citronanu sodného o teplotě 39 ± 1 °C a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, | ||
| pejeta | rozmrazí se ve vodní lázni o teplotě 39 ± 1 °C, její obsah se promíchá a vypustí do zkumavky s roztokem citronanu sodného a aktivita spermií se posuzuje jako u čerstvého spermatu, | ||
| počet aktivních spermií | jako u krátkodobě uchovávaného spermatu | ||
| přežitelnost rozmrazeného beraního spermatu | tepelným testem tak, že se peleta rozmrazí „na sucho“ ve zkumavce ve vodní lázni o teplotě 45 ± 1 °C po dobu 30 minut, poté se přidá k rozmrazené peletě 1,0 cm3 roztoku citronanu sodného o teplotě 45 ± 1 °C a poté se aktivita hodnotí jako u čerstvého spermatu | ||
Poznámky:
*) u každého naředěného ejakulátu se vzorky odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po přípravě
**) vzorky se odebírají sterilně a vyšetřují se bezprostředně po rozmrazení
***) u každého ejakulátu na pracovišti, kde bylo sperma zmraženo a u každého ejakulátu před expedicí
3. Zpracování spermatu
3.1. Ke zpracování spermatu se používají ejakuláty, které odpovídají požadavkům uvedeným v bodě B.
3.2. Veškeré předměty přicházející do styku se spermatem musí být sterilní.
3.3. Produkty živočišného původu používané při ošetření spermatu jsou zdravotně nezávadné.
3.4. Sperma se ředí při laboratorní teplotě 20 až 25 °C, k ředění se používají pouze média, která po konzervaci uchovávají dobrou oplozovací schopnost spermatu a jeho zdravotní nezávadnost a ředí se technologickým postupem podle pokynů výrobce ředidla.,
3.5. Do spermatu se přidávají antibiotika v účinné koncentraci
4. Uchovávání a ředění spermatu
| Krátkodobě uchovávané sperma | beraní sperma | při teplotě 16 až 22 °C při ředění homogenizovaným mlékem |
| kozlí sperma | při teplotě 1až 3 °C při ředění žloutkocitronanovým ředidlem | |
| Dlouhodobě uchovávané sperma | při teplotě –196 °C v tekutém dusíku, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu | |
5. Výdej inseminačních dávek
| Inseminační dávky s krátkodobým použitím | vydávají se podle podmínek daných technologickým postupem; | |
| ředěné beraní sperma | vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 16 až 22 °C, | |
| ředěné kozlí sperma | vydává se v termoboxu s takovým množstvím ledu, aby teplota byla v rozmezí 1 až 3 °C | |
| Zmrazené inseminační dávky | vydávají se v kontejnerech v tekutém dusíku, které jsou uvnitř uzpůsobeny použité technologii zmrazování v peletách nebo pejetách a náležitě desinfikovány před každým naplněním tekutým dusíkem, který nebyl použit pro jiné produkty živočišného původu, přičemž interval desinfekce je dán typem a používáním kontejneru | |
B. Požadavky na kvalitu a identifikaci spermatu a inseminačních dávek
1. Požadavky na kvalitu:
| čerstvé sperma | a) neobsahuje patogenní mikroorganizmy (včetně patogenních plísní) a původce nebezpečných nákaz a nemocí, |
| b) neobsahuje přimíseniny ani shluky spermií, | |
| c) hustota je nejméně u beraního spermatu 2,5 x 106 spermií v 1 mm3 a u kozlího spermatu 2,8 x 106 spermií v 1 mm3, | |
| d) aktivita spermií je nejméně u beraního spermatu 60 % a u kozlího spermatu, 70,0% | |
| e) morfologicky normálních spermií je u beraního spermatu nejméně 80 % a u kozlího spermatu,85 % | |
| krátkodobě uchovávané sperma | vyhovuje ustanovením pro čerstvé sperma a po ředění a konzervování: |
| a) je aktivita spermií nejméně 60 %, | |
| b) v jedné inseminační dávce beraního spermatu je nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií | |
| dlouhodobě uchovávané sperma | vyhovuje požadavkům pro čerstvé sperma a po ředění a konzervován: |
| a) je aktivita spermií po rozmrazení u beraního spermatu nejméně 25 % a u kozlího spermatu nejméně 30 % | |
| b) je v jedné inseminační dávce beraního spermatu nejméně 100 x 106 aktivních spermií, u kozlího spermatu 50 x 106 aktivních spermií |
2. Požadavky na identifikaci:
Obal spermatu při odběru, zpracování, uchovávání a transportu je vždy zřetelně označen státním registrem plemeníka.
C. Technické vybavení inseminační stanice a odběrového místa ovcí a koz
| Část inseminační stanice | technické vybavení: |
|---|---|
| Prostory pro ustájení | plemenní berani jsou ustájeni v kotcích s plochou 3,5 m2 na kus se stálým přívodem pitné vody do automatických napáječek a krmnými žlaby, kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy |
| plemenní kozli jsou ustájeni v indidviduálních kotcích s plochou nejméně 3,5 m2 a s neprůhlednými bočními stěnami; kotce mají pevné, snadno čistitelné a desinfikovatelné podlahy | |
| Prostory pro odběr spermatu | připouštědlo (v místnosti nebo venku), kompletní umělé vagíny, včetně sběračů a tepelné izolace, pomůcky a prostředky pro odběr spermatu (sterilní vazelína, jednorázové rukavice, teploměr, dezinfekční prostředky) |
| Laboratoř pro hodnocení a zpracování spermatu | mikroskop se zvětšením 1 : 1000 až 1500, mikroskopem s fázovým kontrastem, fotometr, termostat, Bürkerova počítací komůrka, termostat, chladnice nebo chladící vitrína, zařízení na plnění, zatavování a značení pejet, rampay, širokohrdlé kontejnery s termočlánkem nebo automatickým zmrazovačem, teploměry, ředidla, antibiotika, pejety |
| Prostory pro dezinfekci a sterilizaci | horkovzdušný sterilizátor a desinfekční chemikálie, zdroj teplé vody*) |
| Prostory pro uložení inseminačních dávek | provozní kontejnery, zásobní kontejnery pro uložení pejet nebo pelet, transportní kontejnery, polystyrénové nádoby na tekutý dusík, rukavice, pomůcky a ochranný štít pro manipulaci s tekutým dusíkem |
Vybavení odběrového místa
Odběrové místo splňuje podmínky ustájení a požadavky na technické vybavení, kterými lze zajistit hygienický odběr spermatu, jeho zpracování a uložení.
D. Druh a obsah evidencí vedených na inseminační stanici
| druh evidence: | obsah evidence: |
|---|---|
| 1.stájová evidence plemeníka | a) ušní číslo, b) číslo státního registru plemeníka, c) plemeno a datum narození plemeníka |
| 2. evidenční karta plemeníka | a) identifikační údaje plemeníka, b)záznamy veterinárního dozoru, c) ostatní doklady týkající se plemeníka |
| 3. záznam o odběru spermatu | všechny údaje o hodnoceném spermatu včetně jeho zpracování a kontroly přežitelnosti spermií v chronologickém sledu |
| 4. záznam o výdeji inseminačních dávek | a) jméno, název odběratele, b) datum výdeje, c) datum odběru spermatu, d) číslo státního registru a linie plemeníků, e) počet inseminačních dávek |
E. Technologické a hygienické postupy při inseminaci a skladování inseminačních dávek
1. Před inseminací plemenice provede osoba oprávněná nebo chovatel provádějící inseminaci reprodukční anamnézu: po posouzení záznamů v dokladu plemenice zhodnotí dobu po jejím obahnění nebo okozlení do ohlášení říje, případně dobu od poslední inseminace a z inseminace vyloučí plemenice s nefyziologickým výtokem z pohlavních orgánů, s příznaky nákazy nebo jiného onemocnění, plemenice mimo říji a plemenice neoznačené.
2. Říjící se ovce nebo kozy jsou vybírány zpravidla s pomocí plemeníka, který působí v přirozené plemenitbě. Inseminace ovcí se provádí od poloviny do začátku třetí třetiny říje, mezi 12 až 18 hodinou říje, u koz zpravidla 10 až 12 hodin od nástupu říje.
3. K inseminaci se používá jen sperma splňující stanovené podmínky, při dodržení technologického postupu přípravy inseminační dávky.
4. Při inseminaci postupuje oprávněná osoba nebo chovatel tak, že:
4.1. dbá o hygienu inseminace,
4.2. inseminaci provádí v připouštědlech,
4.3. dodržuje správný postup inseminace ovcí a koz čerstvým nebo zmraženým spermatem.
F. Technické vybavení pro provádění inseminace ovcí a koz (podle druhu inseminačních dávek)
1. spekulum s vnitřním osvětlením,
2. skleněné nebo jednorázové plastové pipety,
3. výtlačné gumové balonky nebo jednorázové injekční stříkačky,
4. transportní kontejner s vnitřním vybavením,
5. parafinový olej, líh, vata a nůžky.
G. Druh a obsah záznamů o inseminaci, způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidence
1. Chovatelé vedou stájový zápisník plemenic zařazených do inseminace, do kterého zaznamenávají ušní čísla a data narození plemenic a osoby oprávněné a chovatelé provádějící inseminaci do něj zaznamenávají údaje o každé inseminaci.
2. Osoba pověřená vedením ústřední evidence přejímá, zpracovává a vyhodnocuje údaje o inseminaci bahnic jen na základě žádosti chovatele, jemuž předává vyhodnocené údaje v dohodnutých termínech a za smluvních podmínek.