3. Pufry pro účely nepřímého testu ELISA
3.1. Dvojnásobný uhličitanový potahovací pufr, pH 9,6.
| Na2CO3 | 6,36 g |
| NaH CO3 | 11,72 g |
| Destilovaná voda | 1,00 l |
Rozpustí se složky, zkontroluje pH a steriluje autoklávováním při teplotě 121 °C po dobu 15 minut.
Pokud extrakt obsahuje vysoký podíl aromatických molekul, je možné jako antioxidant přidat siřičitan sodný (0,2 %).
3.2. Desetinásobný roztok chloridu sodného pufrovaný fosfátem (10 x PBS), pH 7,4
| NaCl | 80,0 g |
| KH2PO4 | 2,0 g |
| Na2HPO4 . 12H2O | 29,0 g |
| KCl | 2,0 g |
| Destilovaná voda | 1,00 l |
3.3. PBS-Tween
| 10 x PBS | 100 ml |
| 10 % Tween 20 | 5 ml |
| Destilovaná voda | 895 ml |
3.4. Blokační pufr (musí být čerstvě připraven).
| 10 x PBS | 10,0 ml |
| Polyvinylpyrrolidon-44000 (PVP-44) | 2,0 g |
| 10 % Tween 20 | 0,5 ml |
| Sušené mléko | 0,5 g |
| Destilovaná voda | doplnit do 100 ml |
3.5. Roztok pro substrát alkalické fosfatázy, pH 9,8
| Diethanolamin | 97 ml |
| Destilovaná voda | 800 ml |
Rozpustí se a koncentrovanou HCl se upraví pH na 9,8.
Doplní se do 1 l destilovanou vodou.
Přidá se 0,2 g MgCl2.
Rozpustí se dvě 5 mg tabletky fosfatázového substrátu (Sigma) v 15 ml roztoku.