4. Hybridizační roztok
| 1x Hybmix | |
| Sodium dodecyl sulfát (SDS) | 0,01 % |
| Formamid | 30 % |
| Sonda EUB 338 | 5 ng/µl |
| Sonda OLI-1 nebo OLI2 | 5 ng/µl |
Připraví se množství hybridizačního roztoku podle výpočtů v tabulce 1. Pro každé sklíčko (obsahující dvojmo 2 různé vzorky) je třeba 90 µl hybridizačního roztoku.UPOZORNĚNÍ: FORMAMID JE VELMI JEDOVATÝ, NUTNO POUŽÍVAT RUKAVICE A UČINIT POTŘEBNÁ BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ!
Tabulka1. Doporučená množství pro přípravu hybridizační směsi
| Počet sklíček | 1 | 4 | 6 | 8 | 10 |
|---|---|---|---|---|---|
| Sterilní ultra čistá voda | 23,1 | 92,4 | 138,6 | 184,8 | 231,0 |
| 3 x Hybmix | 30,0 | 120,0 | 180,0 | 240,0 | 300,0 |
| 1 % SDS | 0,9 | 3,6 | 5,4 | 7,2 | 9,0 |
| Formamid | 27,0 | 108,0 | 162,0 | 216,0 | 270,0 |
| Sonda EUB 338 (100 ng/µl) | 4,5 | 18,0 | 27,0 | 36,0 | 45,0 |
| Sonda OLI-1 nebo OLI2 (100 ng/µl) | 4,5 | 18,0 | 27,0 | 36,0 | 45,0 |
| Celkové množství | 90,0 | 360,0 | 540,0 | 720,0 | 900,0 |
Poznámka:
Všechny roztoky obsahující světlocitlivé oligosondy se uchovávají v temnu při teplotě - 20 °C. Během použití se chrání před přímým slunečním zářením nebo elektrickým světlem.