1.5.2.3 Negativní a pozitivní kontroly
Každý test musí zahrnovat i souběžnou kmenově specifickou pozitivní a negativní (rozpouštědlo nebo vehikulum) kontrolu, jak s metabolickou aktivací, tak bez ní. Pro pozitivní kontrolu se volí takové koncentrace, jež prokazují efektivnost daného testu.
U testů s metabolickým aktivačním systémem se referenční látka pro pozitivní kontrolu volí podle použitého typu bakteriálního kmene.
Příklady látek, jež jsou vhodné pro pozitivní kontrolu v testech s metabolickou aktivací, uvádí tabulka:
| Látka | CAS | EINECS |
|---|---|---|
| 9,10-dimethylantracen | 781-43-1 | 212-308-4 |
| 7,12-dimethylbenz[a] antracen | 57-97-6 | 200-359-5 |
| benz[a]pyren | 50-32-8 | 200-028-5 |
| 2-aminoantracen | 613-13-8 | 210-330-9 |
| cyklofosfamid monohydrát cyklofosfamidu | 50-18-0 6055-19-2 | 200-015-4 |
Následující látka je vhodnou pozitivní kontrolou při použití metabolické aktivace reduktázami:
| Látka | CAS | EINECS |
|---|---|---|
| Kongo červeň | 573-58-0 | 209-358-4 |
2-aminoantracen se nepoužívá jako jediný indikátor účinnosti směsi S9. Pokud se 2-aminoantracen použije, je třeba každou šarži S9 charakterizovat také mutagenem, který vyžaduje metabolickou aktivaci mikrosomálními enzymy, např. benz[a]pyrenem, dimethylbenzantracenem.
Příklady látek, jež jsou vhodné pro kmenově specifickou pozitivní kontrolu v testech bez exogenního systému metabolické aktivace, uvádí tato tabulka:
| Látka | CAS | EINECS | |
|---|---|---|---|
| azid sodný | 26628-22-8 | 247-852-1 | TA 1535 a TA 100 |
| 2-nitrofluoren | 607-57-8 | 210-138-5 | TA 98 |
| 9-aminoakridin | 90-45-9 | 201-995-6 | TA 1537, TA 97 a TA 97a |
| ICR 191 | 17070-45-0 | 241-129-4 | TA 1537, TA 97 a TA 97a |
| kumen-hydroperoxid | 80-15-9 | 201-254-7 | TA 102 |
| mitomycin C | 50-07-7 | 200-008-6 | WP2 uvrA a TA 102 |
| N-ethyl-N-nitro-N-nitrosoguanidin | 70-25-7 | 200-730-1 | WP2, WP2uvrA a WP2uvrA(pKM101) |
| 4-nitrochinolin-1-oxid | 56-57-5 | 200-281-1 | WP2, WP2uvrA a WP2uvrA(pKM101) |
| urylfuramid (AF2) | 3688-53-7 | kmeny obsahující plazmidy |
K pozitivní kontrole lze použít i jiné vhodné referenční látky. Jsou-li dostupné, je třeba uvážit použití chemikálií se vztahem k chemické třídě.
Je třeba použít i negativní kontroly sestávající z rozpouštědla nebo vehikula samotného, bez testované látky, se kterými se jinak zachází stejně jako při použití testované látky. Mimoto se použijí i negativní kontroly bez ovlivnění testovanou látkou, ledaže existují historické kontrolní údaje prokazující, že zvolené rozpouštědlo nevyvolává žádné rušivé či mutagenní účinky.