Technické požadavky na ověření jakosti šarže psychomodulační látky
1. Mikrobiologické analýzy
Odběr vzorků na mikrobiologickou analýzu musí být proveden s maximální péčí a podle stanovených hygienických standardů, aby se zabránilo kontaminaci vzorku během odběru.
1.1. Techniky odběru vzorků
Obecné zásady odběru vzorků psychomodulačních látek pro mikrobiologické zkoušení byly sestaveny na základě předběžné normy ČSN P CEN ISO/TS 17728: Mikrobiologie potravního řetězce – techniky odběru vzorků pro mikrobiologické zkoušení potravin a krmiv a technické normy ČSN EN ISO 7218: Všeobecné požadavky a doporučení pro mikrobiologické zkoušení.
Balený výrobek v jednotkovém balení skladovaném při okolní teplotě se odebere bez poškození obalu, označí se identifikačními údaji vzorku (název, podtyp a forma psychomodulační látky, označení šarže, výrobce a název obchodní značky, je-li uveden) a přepraví se do laboratoře za teploty úchovy uvedené na etiketě výrobku nebo při pokojové teplotě (18°C až 27°C - viz ISO 7218).
Plán odběru vzorků
Není ve vyhlášce o psychomodulačních látkách stanoven, odebere se tudíž n = 1, vzorek tak není tvořen podvzorky.
Způsob výběru balených výrobků do vzorku
Náhodný (namátkový) či systematický
Minimální velikost jednoho vzorku balených výrobků
Pokud je odebírán vzorek pro stanovení všech pěti mikroorganismů (MO) uvedených v příloze 3 (mikrobiologické ukazatele bude velikost souhrnného vzorku složeného minimálně ze dvou balení činit minimálně 200 g (ml).
Pokud je odebírán vzorek pro stanovení jednoho druhu mikroorganismu uvedeného v příloze 3 (mikrobiologické ukazatele) je velikost souhrnného vzorku složeného minimálně ze 2 ks balení následující:
Salmonella spp. – min. 80 g
Celkový počet mikroorganismů – min. 40 g
Kvasinky a plísně: min. 40 g na oba MO
Escherichia coli – min. 40 g.
Přeprava vzorku do laboratoře
Při úchově odebraného vzorku a při jeho přepravě musí být zabráněno křížové kontaminaci vzorků, úniku nebo ztrátě či přírůstku vlhkosti. Během přepravy musí být vzorky udržovány za podmínek, pokud možno co nejblíže původním podmínkám skladování vzorků a tyto podmínky musí být dodrženy po celou dobu přepravy vzorku.
Pokud není stanoveno jinak (např. výrobcem nebo platnými právními předpisy), doporučují se pro přepravu vzorků následující teploty:
– stabilní výrobky: okolní teplota (18 °C až 27 °C),
– ostatní výrobky nestabilní při okolní teplotě: 1 °C až 8 °C (ideálně do 4 °C),
Doba přepravy musí být co nejkratší a musí probíhat za řízených teplotních podmínek, aby bylo zajištěno zachování integrity a analytické vlastnosti (která je v zájmu výrobce) vzorků.
1.2. Analytické metody
K zahájení analýz musí dojít do 24 hodin od odběru vzorku.
Při kontrole mikrobiologických požadavků uvedených v příloze č. 3 se postupuje v souladu s českými technickými normami, které se použijí jako referenční metody zkoušení:
| Mikroorganismus | Referenční metody zkoušení |
|---|---|
| Celkový počet mikroorganismů (aerobní mezofilní mikroorganismy) | ČSN EN ISO 4833-1 nebo 2 |
| Kvasinky a plísně | ČSN ISO 21527-1 nebo 2 |
| Escherichia coli | ČSN ISO 16649-1 nebo 2 |
| Salmonella | ČSN EN ISO 6579-1 |
Používání alternativních analytických metod je přijatelné, pokud:
Nejistota měření a vyhodnocení
V případě mikrobiologických požadavků na psychomodulační látky nesmí být nejistota měření zohledněna jako dodatečná tolerance, pokud jde o hodnocení shody naměřené hodnoty s přípustnou hodnotou mikrobiologických požadavků na psychomodulační látky stanovené v příloze č. 3.
a) jsou validovány podle referenční metody uvedené v tabulce v souladu s protokolem stanoveným v normě ČSN EN ISO 16140-2 a
b) jsou validovány pro širokou škálu potravin podle normy ČSN EN ISO 16140-2
2. Chemické analýzy
2.1. Kovy a polokovy, těžké kovy (As, Pb, Cd, Hg)
2.1.1. Odběr vzorků
Velikost souhrnného vzorku min. 100 g nebo 100 ml.
a současně:
Minimální počet a velikost dílčích vzorků psychomodulační látky
| Velikost šarže (počet balení) | Souhrnný vzorek - Počet balení, která musí být odebrána jako vzorek | Velikost laboratorního vzorku |
|---|---|---|
| 1–250 | 2 | Celý obsah balení |
| 251–1 000 | 4 | Polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení odebraného jako vzorek |
| > 1 000 | 4 balení | ≤ 10 balení: polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení |
| + 1 balení na každých dalších 1 000 maloobchodních balení | > 10 balení: z každého balení se odebere stejné množství, aby výsledný vzorek odpovídal obsahu 5 balení | |
| nejvýše 25 maloobchodních balení |
Způsob odběru: Odběr dílčích vzorků z různých míst šarže nebo části šarže
2.1.2. Požadavky na analýzy:
Každý laboratorní vzorek se důkladně promísí (a v případě potřeby se i jemně rozemele).
| Parametr | Charakteristika | |
|---|---|---|
| Specifičnost | Bez matricových nebo spektrálních interferencí | |
| Opakovatelnost (RSDr) | HORRAT r méně než 2 | |
| Reprodukovatelnost (RSDR) | HORRAT R méně než 2 | |
| Výtěžnost | Pokud je v metodě analýzy použita extrakce, analytický výsledek se zkoriguje na výtěžnost. V tomto případě musí být uvedena hodnota výtěžnosti. Pokud v metodě analýzy není použita extrakce (např. u kovů), výsledek může být uveden nekorigovaný na výtěžnost, pokud je doloženo, nejlépe využitím vhodného certifikovaného referenčního materiálu, že bylo dosaženo certifikované koncentrace beroucí v úvahu nejistotu měření (tzn. vysoká přesnost měření) a metoda tedy není ovlivněna chybou správnosti. Pokud je výsledek uváděn nekorigovaný na výtěžnost, je třeba toto uvést. | |
| LOD | = tři desetiny LOQ | |
| LOQ | Olovo, kadmium, rtuť | ≤ jedna pětina přípustné hodnoty |
| Arsen | ≤ dvě třetiny přípustné hodnoty | |
2.2. Mykotoxiny (Aflatoxin B1, Celkový obsah aflatoxinů B1, B2, G1 a G2)
2.2.1. Odběr vzorků
Velikost souhrnného vzorku min. 100 g nebo 100 ml.
a současně:
Minimální počet a velikost dílčích vzorků psychomodulační látky
| Velikost šarže (počet balení) | Souhrnný vzorek - Počet balení, která musí být odebrána jako vzorek | Velikost laboratorního vzorku |
|---|---|---|
| 1–250 | 2 | Celý obsah balení |
| 251–1 000 | 4 | Polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení odebraného jako vzorek |
| > 1 000 | 4 balení | ≤ 10 balení: polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení |
| + 1 balení na každých dalších 1 000 maloobchodních balení | > 10 balení: z každého balení se odebere stejné množství, aby výsledný vzorek odpovídal obsahu 5 balení | |
| nejvýše 25 maloobchodních balení |
Způsob odběru: Odběr dílčích vzorků z různých míst šarže nebo části šarže
Vzorky musí být ihned po odběru vzorku vloženy do světlo nepropustného obalu (pokud nejsou ve světlo nepropustném obalu).
2.2.2. Požadavky na analýzy:
Každý laboratorní vzorek se důkladně promísí (a v případě potřeby se i jemně rozemele).
Výtěžnost: průměrná výtěžnost by se měla pohybovat mezi 70 % až 120 %.
Průměrná výtěžnost je průměrná hodnota z replicitních vzorků získaná během validace při určování parametrů preciznosti RSDr a RSDwR.
Preciznost
RSDr musí činit ≤ 20 %.
RSDwR musí činit ≤ 20 %.
RSDR by měla činit ≤ 25 %.
Tato kritéria se vztahují na všechny koncentrace.
Pokud laboratoř předloží důkazy o tom, že kritérium RSDwR je splněno, není nutné předkládat důkazy pro kritérium RSDr, jelikož soulad s RSDwR zaručuje splnění kritéria RSDr.
Mez stanovitelnosti
Metoda musí splnit požadavek na mez stanovitelnosti (LOQ) pro jednotlivou látku (Aflatoxin B1, B2, G1, G2) 0,001 mg/kg nebo nižší.
Identifikace
Pro identifikaci se použijí kritéria stanovená v Pokynech k identifikaci mykotoxinů a rostlinných toxinů v potravinách a krmivech z 1. 1. 2023 vydané sítí národních referenčních laboratoří spolupracující s referenční laboratoří Evropské unie na mycotoxiny a rostlinné toxiny v potravinách a krmivech a které jsou dostupné na internetových stránkách Evropské komise.
Pozn.
a) Relativní směrodatnou odchylkou opakovatelnosti (RSDr) se rozumí relativní směrodatná odchylka (v %) vypočtená z výsledků získaných za podmínek opakovatelnosti (preciznosti opakovatelnosti): s použitím téže metody na tomtéž materiálu vzorku v jedné laboratoři tímtéž pracovníkem, s tímtéž přístrojem, v krátkém časovém intervalu (jeden den nebo jedna sekvence).
b) Relativní směrodatnou odchylkou vnitrolaboratorní reprodukovatelnosti (RSDwR) se rozumí relativní směrodatná odchylka (v %) vypočtená z výsledků získaných za podmínek vnitrolaboratorní reprodukovatelnosti (mezilehlé preciznosti): s použitím téže metody na tomtéž materiálu vzorku v jedné laboratoři, ale v různých dnech (nejlépe delší časový interval) a může zahrnovat i jiné podmínky, jako je zapojení různých pracovníků a/nebo různých (rovnocenných) přístrojů.
c) Relativní směrodatnou odchylkou reprodukovatelnosti (RSDR) se rozumí relativní směrodatná odchylka (v %) vypočtená z výsledků získaných za podmínek reprodukovatelnosti (mezilaboratorní preciznosti), což znamená, že tentýž materiál analyzují různé laboratoře. RSDR lze odvodit zejména z kolaborativních studií a zkoušek způsobilosti.
d) Mezí stanovitelnosti (LOQ) se rozumí nejnižší obsah analytu, který lze naměřit s rozumnou mírou statistické jistoty. V souvislosti s tímto nařízením se tím rozumí nejnižší úspěšně validované množství: nejnižší testovaná koncentrace analytu v materiálu vzorku, u něhož bylo prokázáno, že jsou splněna kritéria pro výtěžnost, preciznost a identifikaci.
2.3. PAU (suma PAU zahrnující benzo(α)antracen, benzo(b)fluoranten, chryzen, benzo(a)pyren)
2.3.1. Odběr vzorků
Velikost souhrnného vzorku min. 100 g nebo 100 ml.
a současně:
Minimální počet a velikost dílčích vzorků psychomodulační látky
| Velikost šarže (počet balení) | Souhrnný vzorek - Počet balení, která musí být odebrána jako vzorek | Velikost laboratorního vzorku |
|---|---|---|
| 1–250 | 2 | Celý obsah balení |
| 251–1 000 | 4 | Polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení odebraného jako vzorek |
| > 1 000 | 4 balení | ≤ 10 balení: polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení |
| + 1 balení na každých dalších 1 000 maloobchodních balení | > 10 balení: z každého balení se odebere stejné množství, aby výsledný vzorek odpovídal obsahu 5 balení | |
| nejvýše 25 maloobchodních balení |
Způsob odběru: Odběr dílčích vzorků z různých míst šarže nebo části šarže
2.3.2. Požadavky na analýzy:
Každý laboratorní vzorek se důkladně promísí (a v případě potřeby se i jemně rozemele).
| Parametr | Charakteristika |
|---|---|
| Specifičnost | Bez matricových nebo spektrálních interferencí, ověření pozitivní detekce |
| Opakovatelnost (RSDr) | HORRAT r méně než 2 |
| Reprodukovatelnost (RSDR) | HORRAT R méně než 2 |
| Výtěžnost | 50-120 % |
| LOD | ≤ 0,30 μg/kg pro každou ze čtyř látek |
| LOQ | ≤ 0,90 μg/kg pro každou ze čtyř látek |
2.4. Analýza obsahu aktivních látek v psychomodulační látce
Tyto analýzy budou prováděny pro účely ověření splnění požadavků na maximální koncentraci aktivní látky v psychomodulačních látkách.
2.4.1. Odběr vzorků
Velikost souhrnného vzorku min. 100 g nebo 100 ml.
a současně:
Minimální počet a velikost dílčích vzorků psychomodulační látky
| Velikost šarže (počet balení) | Souhrnný vzorek - Počet balení, která musí být odebrána jako vzorek | Velikost laboratorního vzorku |
|---|---|---|
| 1–250 | 2 | Celý obsah balení |
| 251–1 000 | 4 | Polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení odebraného jako vzorek |
| > 1 000 | 4 balení | ≤ 10 balení: polovina obsahu balení z každého maloobchodního balení |
| + 1 balení na každých dalších 1 000 maloobchodních balení | > 10 balení: z každého balení se odebere stejné množství, aby výsledný vzorek odpovídal obsahu 5 balení | |
| nejvýše 25 maloobchodních balení |
Způsob odběru: Odběr dílčích vzorků z různých míst šarže nebo části šarže
2.4.2. Požadavky na analýzy
Každý laboratorní vzorek se důkladně promísí (a v případě potřeby se i jemně rozemele).
Pro stanovení se použije metoda kapalinové chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí (LC-MS/MS).
Výtěžnost: průměrná výtěžnost by se měla pohybovat mezi 70 % až 120 %.
Průměrná výtěžnost je průměrná hodnota z replicitních vzorků získaná během validace při určování parametrů preciznosti RSDr a RSDwR.
Preciznost
RSDr musí činit ≤ 20 %.
RSDwR musí činit ≤ 20 %.
RSDR by měla činit ≤ 25 %.
Tato kritéria se vztahují na všechny koncentrace.
Pokud laboratoř předloží důkazy o tom, že kritérium RSDwR je splněno, není nutné předkládat důkazy pro kritérium RSDr, jelikož soulad s RSDwR zaručuje splnění kritéria RSDr.
Mez stanovitelnosti
Metoda musí splnit požadavek na mez stanovitelnosti (LOQ) pro každý z analytů ve výši max. 1 mg/kg
Identifikace
Pro identifikaci se použijí kritéria stanovená v Pokynech k identifikaci mykotoxinů a rostlinných toxinů v potravinách a krmivech z 1. 1. 2023 vydané sítí národních referenčních laboratoří spolupracující s referenční laboratoří Evropské unie na mycotoxiny a rostlinné toxiny v potravinách a krmivech a které jsou dostupné na internetových stránkách Evropské komise.
2.5. Přístup k odběru vzorků pro chemické analýzy (prvky, aflatoxiny, PAU a aktivní látky)
2.5.1. Odběr vzorků pro chemické analýzy (prvky, aflatoxiny, PAU a aktivní látky)
Velikosti vzorků uvedené v bodech 2.1.1, 2.2.1, 2.3.1 a 2.4.1 musí být splněny v případě, kdy je zkoušení vzorků prováděno různými laboratořemi (tedy provádění zkoušek pro zjištění obsahu prvků, aflatoxinů, PAU a aktivních látek je prováděno pro každou skupinu látek zvlášť v jiné laboratoři).
V případě, kdy je v jedné laboratoří prováděno zkoušení na několik skupin výše uvedených analýz, je množství vzorku odebírané do takové laboratoře min. 100 g nebo 100 ml dle požadavku na min. velikost vzorku od laboratoře, která bude provádět zkoušení vzorků (velikost souhrnného vzorku tak nemusí být součtem velikostí souhrnného vzorku uvedených v jednotlivých bodech 2.1-2.4). Současně však musí být zajištěno splnění požadavků na minimální počet a velikosti dílčích vzorků uvedených v příslušné tabulce pod některým z bodů 2.1.1, 2.2.1, 2.3.1 a 2.4.1.
3. Přijetí šarže
3.1. Přijetí šarže pro případ prokázání splnění maximální koncentrace aktivních látek v psychomodulační látce
Přijetí: Jestliže laboratorní vzorek vyhovuje maximální koncentraci aktivních látek uvedené příloze č. 1 k této vyhlášce po korekci na výtěžnost a se zohledněním nejistoty měření v neprospěch posuzované maximální koncentrace (pozn. nejistota měření se v tomto případě zohlední pouze tak, že se přičítá k naměřené hodnotě).
3.2. Přijetí šarže pro případ prokázání splnění mikrobiologických požadavků na psychomodulační látky
Přijetí: Jestliže laboratorní vzorek vyhovuje přípustné hodnotě mikrobiologických ukazatelů uvedené v příloze č. 3 k této vyhlášce. Nejistota měření se nezohledňuje.
3.3. Přijetí šarže pro případ prokázání splnění chemických požadavků na psychomodulační látky
Přijetí: Jestliže laboratorní vzorek vyhovuje přípustné hodnotě chemických ukazatelů uvedené v příloze č. 3 k této vyhlášce po korekci na výtěžnost a se zohledněním nejistoty měření v neprospěch posuzované maximální koncentrace (pozn. nejistota měření se v tomto případě zohlední pouze tak, že se přičítá k naměřené hodnotě).
3.4. Přijetí šarže pro případ prokázání splnění deklarovaného množství aktivní látky
Přijetí: Jestliže laboratorní vzorek vyhovuje deklarovanému množství aktivní látky na obalu psychomodulační látky po korekci na výtěžnost se zohledněním nejistoty měření v neprospěch posuzovaného maximálního množství aktivní látky.
3.5. Přijetí šarže pro případ prokázání splnění deklarovaného množství psychomodulační látky v jednotkovém balení
Přijetí: Jestliže laboratorní vzorek vyhovuje deklarovanému množství psychomodulační látky v jednotkovém balení a nepřekračuje maximální množství psychomodulační látky v jednotkovém balení uvedené v příloze č. 1 k této vyhlášce.